ELISA加樣時如何避免氣泡的產(chǎn)生?

來源：上海恒遠生物科技有限公司 2021年03月01日 11:47

相信大家在很多說明書或教科書上都看到過這樣的一條提示，就是加樣時要避免出現(xiàn)氣泡，這到底是什么原因呢？因為在做實驗的過程中，有時為了打干凈槍頭里面的液體，很容易產(chǎn)生氣泡，這樣對實驗結果會產(chǎn)生什么影響呢?

1.通常氣泡都是聚集在酶標板的孔周圍，導致孔中液體不能與孔壁有效接觸，使

2.孔內(nèi)反應不均一。

3.包被時有氣泡的話，將導致包被不*實際包被量下降--弱陽性甚至假陰性。

4.封閉時有氣泡的話，將導致大量未結合位點的存在，引起非特異性結合--本底增高，假陽性。

5.加樣時有氣泡的話，抗原抗體不能有效的結合--弱陽性甚至假陰性。

6.加二抗時有氣泡的話，抗原抗體不能有效的結合--弱陽性甚至假陰性（競爭法相反----假陽性）。

7.加顯色液時有氣泡的話--－顯色不*。

8.加終止液時有氣泡的話（1、不能*終止反應 2、影響酶標儀比色，OD值增高）

9.洗滌時有氣泡的話，非特異性結合物不能*洗去，做無用功。

避免方法：

1、加樣時盡量靠近孔底（不要接觸孔底），用力均勻，不要過快過猛。

2、封閉時一定要加滿孔，

3、洗滌時一定要加滿孔(重要），氣泡會浮上來終驅除。手工洗板時一定要吸干水分并用力拍干。

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