競爭法ELISA檢測目標(biāo)：

   抗體、抗原、蛋白、代謝產(chǎn)物

試劑盒的關(guān)鍵：（以直接競爭法為例）

1. 捕獲目的蛋白的抗體

2. 使試劑顯色的酶標(biāo)記抗原

    實(shí)驗(yàn)溫度會影響微觀分子運(yùn)動的速率以及活化分子比率。溫度越高，微觀分子運(yùn)動增加，分子碰撞次數(shù)增加，活化分子比率增加。

   同樣對于酶參與的催化反應(yīng)，過高或過低溫度都會影響酶的活性，從而影響反應(yīng)效率。

   建議：參看產(chǎn)品使用說明，嚴(yán)格按照產(chǎn)品說明推薦溫度操作實(shí)驗(yàn)。

競爭法ELISA離不開振蕩器的使用。

   為什么振蕩器對實(shí)驗(yàn)如此重要呢？讓小編帶你走進(jìn)微觀世界的ELISA檢測（如上圖）。

   從微觀的角度上，固相與液相之間會形成一層具有邊界效應(yīng)的界面，稱為邊界層，這個層面在一定程度上會影響抗原與抗體的充分結(jié)合。而振蕩器就能夠起到打破邊界層的阻礙效果，輔助抗原抗體更加充分結(jié)合。

   通常情況下，大家常常關(guān)注到振蕩器的轉(zhuǎn)速，也就是500 rpm，然而另一個重要細(xì)節(jié)往往會被忽略——軌道直徑。

   軌道直徑 ，又稱振幅，也就是托盤振蕩一圈時的直徑。根據(jù)天津阿斯?fàn)柹锟萍加邢薰镜膶?shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)，當(dāng)振蕩器振速或振幅不足時，可能會造成整體OD值偏低的結(jié)果。當(dāng)振幅過大時，可能會造成微孔板內(nèi)液體飛濺、樣品孔污染，進(jìn)而影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

   英國RSR開發(fā)總部使用的是德國IKA MTS 2/4振蕩器，如下圖所示。

   該產(chǎn)品軌道直徑3mm，支持1-4個ELISA板同時振蕩，且能夠確保微孔板在振蕩時既不會松脫也不會有液體飛濺。

   經(jīng)過RSR TJ的實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，美國精騏振蕩器HYQ-3111同樣滿足RSR旗下競爭法ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)需求。（轉(zhuǎn)速200~3000rpm，振幅4.5mm）。當(dāng)您不確定實(shí)驗(yàn)室的振蕩器是否滿足ELISA實(shí)驗(yàn)規(guī)定時，可進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)以確保得到穩(wěn)定重現(xiàn)性。

   小小振蕩器，卻藏有這么多不可忽略的小細(xì)節(jié)，進(jìn)而影響到最終實(shí)驗(yàn)的成敗。因此當(dāng)我們準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)的時候，認(rèn)真遵循說明書，如果能對實(shí)驗(yàn)的基本原理了解透徹，可以更加保證結(jié)果的準(zhǔn)確。