87050細(xì)胞培養(yǎng)管進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)的方法
87050細(xì)胞培養(yǎng)管是用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞用的試管。分一次性培養(yǎng)試管、可反復(fù)使用試管,但多數(shù)為一次性。采用透明高分子材料聚苯乙烯(GPPS)制成,高科技表面處理技術(shù)處理產(chǎn)品表面成疏水/親水涂層,適宜細(xì)胞/組織的懸浮/貼壁生長(zhǎng)。緊密貼合的孔蓋,可有效防止細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中培養(yǎng)基的污染與蒸發(fā)的損耗。根據(jù)細(xì)胞培養(yǎng)管蓋子可分為螺旋帽、直拔帽和氣柵蓋三種。根據(jù)細(xì)胞培養(yǎng)體積需要有4.5cm、12cm、14cm等不同規(guī)格的細(xì)胞培養(yǎng)管。
一次性塑料培養(yǎng)管主要應(yīng)用于組織培養(yǎng)、細(xì)菌培養(yǎng),臨床樣品、粉末或液體樣品的存儲(chǔ),作為多種分子生物學(xué)測(cè)試用耗材,如Elisa實(shí)驗(yàn)、RIA分析實(shí)驗(yàn)及流式細(xì)胞測(cè)試。使用一次性塑料培養(yǎng)管是臨床樣品存儲(chǔ)、細(xì)菌等組織培養(yǎng)、分子生物學(xué)測(cè)試用耗材的選擇。
87050細(xì)胞培養(yǎng)管進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)的方法:
(1)細(xì)胞傳代
將細(xì)胞瓶中的生長(zhǎng)液倒去,加入MEM液(大概6ml左右)清洗,倒去;加入EDTA-胰酶(根據(jù)細(xì)胞消化情況而加量),倒去;再加入EDTA-胰酶,放置培養(yǎng)箱,進(jìn)行消化(大概10分鐘左右),待其細(xì)胞開(kāi)始脫落后(在細(xì)胞瓶中呈毛玻璃);吸干EDTA-胰酶倒去,放置培養(yǎng)箱一段時(shí)間(細(xì)胞呈逐個(gè)完整),取出;【細(xì)胞生長(zhǎng)好,多,可1傳3或者1傳4】將配好的細(xì)胞生長(zhǎng)液吸入,吹打混勻,待*脫落至過(guò)長(zhǎng)液中;將其分裝入細(xì)胞瓶和細(xì)胞板中。
?。?)標(biāo)本處理
復(fù)融,從-70℃冰箱取出,常溫下溶解;充分震蕩,后取出試導(dǎo),至4℃冰箱中,靜置20分鐘左右;取螺旋管,在其加入0.2ml的雙抗(20%),后加入1.8ml的病毒液,放置4℃,過(guò)夜上毒。
(3)細(xì)胞上毒(需培養(yǎng)一周)洗細(xì)胞,將細(xì)胞板(前一天)上的液體(生長(zhǎng)液)吸干,加入1ml的MEM,清洗,重復(fù)一次,然后吸干;加入處理后的病毒液180ul;放置CO2培養(yǎng)箱中1.5h。將細(xì)胞板取;1ml/孔加入病毒過(guò)長(zhǎng)液后,放置CO2培養(yǎng)箱,培養(yǎng)一周;并將上周上毒的細(xì)胞液取出,放置-70℃冰箱,隔天鑒定。
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