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全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀在單細(xì)胞測(cè)序中的應(yīng)用如下
全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀是一種基于經(jīng)典臺(tái)盼藍(lán)染色法原理開(kāi)發(fā)的細(xì)胞計(jì)數(shù)分析儀，集成了*的光學(xué)成像技術(shù)和智能圖像識(shí)別技術(shù)，可以快速準(zhǔn)確地測(cè)量細(xì)胞濃度和細(xì)胞活力，為細(xì)胞計(jì)數(shù)人員提供方便，消除了繁瑣的過(guò)程，血細(xì)胞計(jì)數(shù)板引起的時(shí)間長(zhǎng)、誤差大等問(wèn)題。
目前，全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀廣泛應(yīng)用于各種科學(xué)研究活動(dòng)，包括癌癥、免疫學(xué)、傳染病、干細(xì)胞、臨床試驗(yàn)以及農(nóng)作物和家禽疾病預(yù)防研究。同時(shí)，它還廣泛涉及醫(yī)療領(lǐng)域、生物制藥、細(xì)胞治療、工業(yè)生產(chǎn)和農(nóng)業(yè)生產(chǎn)。
全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的計(jì)數(shù)方法：
1、臺(tái)盼藍(lán)染色法：
臺(tái)盼藍(lán)染色是分別計(jì)數(shù)死亡細(xì)胞和活細(xì)胞的方法之一。染色的原理是臺(tái)盼藍(lán)無(wú)法穿透活細(xì)胞的完整細(xì)胞膜，因此活細(xì)胞不被染色；然而，死亡細(xì)胞的細(xì)胞膜被破壞，染料通過(guò)細(xì)胞膜在細(xì)胞中富集，使細(xì)胞變藍(lán)。然而，臺(tái)盼藍(lán)染色可能無(wú)法準(zhǔn)確區(qū)分有核細(xì)胞和細(xì)胞碎片，因此它傾向于低估細(xì)胞總數(shù)并高估細(xì)胞生存能力。
2、熒光細(xì)胞計(jì)數(shù)法：
吖啶橙/碘化丙啶染色原理：活細(xì)胞通過(guò)AO染色發(fā)出綠色熒光，而死細(xì)胞通過(guò)PI染色發(fā)出紅色熒光。重要的是，對(duì)于具有復(fù)雜背景的細(xì)胞，例如外周血單核細(xì)胞，具有更多細(xì)胞片段或簇的細(xì)胞數(shù)量可以避免檢測(cè)到細(xì)胞片段。這種方法最近也被應(yīng)用于單細(xì)胞基因組學(xué)，其中綠色對(duì)應(yīng)于完整的細(xì)胞，紅色對(duì)應(yīng)于成功分離的細(xì)胞核。該策略允許研究人員計(jì)算未裂解的剩余細(xì)胞在細(xì)胞總數(shù)中的百分比，并計(jì)數(shù)細(xì)胞核以指示樣品質(zhì)量，幫助研究人員確定是否繼續(xù)單細(xì)胞基因組學(xué)過(guò)程。
全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀在單細(xì)胞測(cè)序中的應(yīng)用如下：
單細(xì)胞基因組學(xué)技術(shù)目前正在全面應(yīng)用，如單細(xì)胞RNA測(cè)序和染色質(zhì)轉(zhuǎn)座酶可及性測(cè)序。與對(duì)大量細(xì)胞進(jìn)行測(cè)序的傳統(tǒng)方法相比，單細(xì)胞基因組學(xué)技術(shù)突出了細(xì)胞之間的差異，這有助于更深入地了解樣本材料。例如，scRNA-seq可以比較健康和患病狀態(tài)的轉(zhuǎn)錄譜，而ATAC-seq可以解釋染色質(zhì)的可及性及其對(duì)基因表達(dá)的影響。
然而，這些研究都需要對(duì)分離的細(xì)胞核進(jìn)行精確計(jì)數(shù)，因?yàn)槲膸?kù)制備需要少量未裂解的細(xì)胞，并且樣品中沒(méi)有細(xì)胞團(tuán)塊和碎片。此外，許多單細(xì)胞基因組學(xué)技術(shù)需要完整的細(xì)胞核才能正常工作。
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