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無血清培養(yǎng)基的廣泛應用

來源:上海昊則生物科技有限公司   2023年02月28日 11:13  
無血清培養(yǎng)基和試劑被廣泛的應用于培養(yǎng)哺乳動物和無脊椎動物細胞以制備單克隆抗體,病毒抗原和重組蛋白等。大多數的無血清培養(yǎng)基含有向細胞內轉運離子的鐵轉蛋白和調節(jié)葡萄糖攝取量的胰島素,以及一些蛋白質和清蛋白,纖維蛋白,胎球蛋白等,這些蛋白在細胞培養(yǎng)中發(fā)揮各種不同的功能,如提供細胞貼壁所需的基質,抗生物反應器剪切力,作為脂質和其他生長分化因子的載體等。
血清仍是動物細胞培養(yǎng)中基本的的添加物,尤其是在原代培養(yǎng)或者細胞生長狀況不良時,常常會先使用有血清的培養(yǎng)液進行培養(yǎng),待細胞生長旺盛以后,再換成無血清培養(yǎng)液。細胞轉入無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)要有一個適應過程,一般要逐步降低血清濃度,從10%減少到5%,3%,1%,直至無血清培養(yǎng)。在降低過程中要注意觀察細胞形態(tài)是否發(fā)生變化,是否有部分細胞死亡,存活細胞是否還保持原有的功能和生物學特性等。在實驗后這些細胞一般不再繼續(xù)保留,很少有細胞能夠長期培養(yǎng)于無血清培養(yǎng)基而不發(fā)生改變的。細胞轉入無血清培養(yǎng)之前,要留有種子細胞,種子細胞按常規(guī)培養(yǎng)于含血清的培養(yǎng)基中,以保證細胞的特性不發(fā)生變化。
優(yōu)點
1.可避免血清批次間的質量變動,提高細胞培養(yǎng)和實驗結果的重復性。
2.避免血清對細胞的毒性作用和血清源性污染。
3.避免血清組分對實驗研究的影響。
4.有利于體外培養(yǎng)細胞的分化。
5.可提高產品的表達水平并使細胞產品易于純化。 

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