一、試驗原理:
用于分離培養(yǎng)病原性金黃SE葡萄球菌。
蛋白胨和牛肉粉提供氮源、維生素和生長因子;D—甘露醇為可發(fā)酵糖類;7.5%濃度氯化鈉可抑制除葡萄球菌外的大部分微生物的生長;瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑;酚紅為pH指示劑,金黃SE葡萄球菌可分解培養(yǎng)基中的甘露醇產(chǎn)酸,使菌落周圍變黃,并能降解卵黃中的卵磷脂使菌落產(chǎn)生暈圈。
二、培養(yǎng)基配方(g/L):
蛋白胨 | 10.0 |
D-甘露醇 | 10.0 |
牛肉粉 | 2.5 |
氯化鈉 | 75.0 |
酚紅 | 0.025 |
瓊脂 | 15.0 |
pH 7.4±0.2 25℃ |
三、試驗方法:
粉體裝培養(yǎng)基的使用:
1. 稱取本品112.5g,加熱攪拌溶解于1000ml蒸餾水中,煮沸1分鐘,121℃高壓滅菌15分鐘,待培養(yǎng)基冷卻至45-50℃時,無菌操作,加入50%卵黃乳液30ml,搖勻,傾入無菌平皿,備用。
2. 制備質(zhì)控菌液。
3. 選擇合適稀釋度的質(zhì)控菌液0.1ml,均勻涂布于平板上,每一稀釋度接種兩個平板。用1μL接種環(huán)取非目標(biāo)菌質(zhì)控菌液1環(huán),將接種環(huán)接觸容器邊緣3次去除多余液體,在平板表面劃六條平行直線,同時接種兩個平板。
4. 36±1℃需氧培養(yǎng)24-48小時,記錄實驗結(jié)果。
四、結(jié)果觀察與解釋
接種以下質(zhì)控菌株,36±1℃需氧培養(yǎng)24-48小時:
質(zhì)控菌株菌株編號接種量(CFU)參比或計數(shù)培養(yǎng)基方法質(zhì)控評定標(biāo)準(zhǔn)其他特征大腸埃希氏菌ATCC25922//半定量G≤1/傷寒SHA門氏菌ATCC14028//G≤1/金黃SE葡萄球菌ATCC653820-200TSA定量PR≥0.7黃色菌落,菌落周圍有暈圈金黃SE葡萄球菌ATCC2592320-200PR≥0.7黃色菌落,菌落周圍有暈圈表皮葡萄球菌CMCC(B)2606920-200PR≥0.7紅色菌落,沒有暈圈
五、注意事項:
本培養(yǎng)基僅為細(xì)菌鑒定的一部分,需做其他補充試驗。
注:本文屬海博生物原創(chuàng),未經(jīng)允許不得轉(zhuǎn)載。
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