歡迎聯(lián)系我
有什么可以幫您?
在線咨詢
HPLC 液相色譜柱如何選購?
來源:深圳市恒譜生科學儀器有限公司
2025年06月25日 15:42
- 考慮分析物的性質:
- 化學結構:極性強的化合物在反相色譜柱上保留弱,含芳香環(huán)的化合物,使用苯基 / 苯乙基固定相可能效果更好。
- 穩(wěn)定性:了解分析物對 pH、溫度的敏感程度,避免選擇在不適宜條件下不穩(wěn)定的色譜柱。
- 分子量范圍:小分子通常使用 80-120Å 孔徑的色譜柱;多肽適合 120-200Å 孔徑;蛋白質等大分子則需要≥300Å 孔徑的色譜柱。
- 選擇固定相:
- 鍵合相類型:反相色譜中,C18 柱通用性強;C8 柱疏水性稍弱;苯基 / 苯乙基柱對含芳香環(huán)化合物有獨特選擇性。正相色譜適用于極性化合物和異構體分離。親水作用色譜用于強極性、親水性化合物。離子交換色譜適用于帶電荷化合物。尺寸排阻色譜依據(jù)分子大小分離,常用于測定蛋白質、聚合物的分子量分布。
- 鍵合相密度:高密度覆蓋的鍵合相可減少硅醇基效應,使分析結果更穩(wěn)定。
- 封端:封端處理可減少殘余硅醇基與堿性化合物的次級相互作用,改善峰形。
- 確定色譜柱尺寸:
- 柱長:較長的色譜柱分離度更高,但分析時間長、柱壓高;短柱則相反??焖俜治龀S?50-100mm 的短柱;復雜樣品分離用 150-250mm 的長柱。
- 內徑:4.6mm 內徑的色譜柱通用性好;1.0mm 或更小內徑的微徑柱常用于質譜聯(lián)用;內徑大于 4.6mm 的半制備 / 制備柱適用于樣品制備分離。
- 考慮硅膠基質:
- 純度:高純度硅膠金屬雜質含量低,能有效改善峰形和穩(wěn)定性;低純度硅膠成本低,但可能影響結果準確性和重復性。
- pH 耐受范圍:常規(guī)硅膠柱在 pH2-8 范圍內使用,雜化顆粒技術柱 pH 耐受范圍可拓寬至 1-12。
- 溫度耐受性:常規(guī)硅膠柱通常耐受溫度低于 60°C,雜化顆?;蛱厥怄I合柱可耐受更高溫度。
- 其他因素:
- 流動相條件:確保色譜柱能耐受流動相的 pH,且流動相中的緩沖鹽、添加劑與固定相兼容。
- 儀器系統(tǒng):根據(jù)儀器的耐壓能力選擇合適的色譜柱,UHPLC 柱需要超高壓系統(tǒng),常規(guī) HPLC 柱在普通 HPLC 系統(tǒng)上即可使用。
- 應用要求:根據(jù)分離度、分析速度、靈敏度、穩(wěn)定性等應用要求選擇色譜柱。同時,也要考慮成本因素,在性能和預算之間找到平衡。
免責聲明
-
凡本網(wǎng)注明“來源:化工儀器網(wǎng)”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權或有權使用的作品,未經本網(wǎng)授權不得轉載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經本網(wǎng)授權使用作品的,應在授權范圍內使用,并注明“來源:化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者,本網(wǎng)將追究其相關法律責任。
- 本網(wǎng)轉載并注明自其他來源(非化工儀器網(wǎng))的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網(wǎng)贊同其觀點和對其真實性負責,不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網(wǎng)站或個人從本網(wǎng)轉載時,必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源,并自負版權等法律責任。
- 如涉及作品內容、版權等問題,請在作品發(fā)表之日起一周內與本網(wǎng)聯(lián)系,否則視為放棄相關權利。
Copyright chem17.com All Rights Reserved 法律顧問:浙江天冊律師事務所 賈熙明律師
-
全年征稿/資訊合作
0571-87759900
點我咨詢
-
-
-
-
采購中心
采購專員1對1咨詢
企業(yè)未開通此功能
詳詢客服 : 0571-87858618