液相色譜柱的使用和維護保養(yǎng)需要遵循以下關(guān)鍵要點:
一、使用規(guī)范
?流動相選擇?
需與色譜柱和樣品兼容,避免使用超出pH耐受范圍的流動相?。含緩沖鹽的流動相需先用水相過渡(如10%甲醇水)沖洗20倍柱體積,再切換為純有機相?。
?流速與壓力控制?
嚴格按色譜柱規(guī)格設(shè)置流速,避免超壓或跑空色譜柱?。反向沖洗僅限特殊情況,通常需保持流向與柱標示一致?。
?新柱活化?
C18柱需用甲醇小流速沖洗至少20倍柱體積,再用流動相平衡30分鐘以上。
二、維護保養(yǎng)
?日常沖洗?
含鹽流動相:先用水過渡,再用高比例有機相(如甲醇/乙腈)沖洗20倍柱體積?。
長期停用:保存于85%有機相中,兩端密封防干裂?。
?污染處理?
柱頭污染:用純有機相沖洗或拆下柱頭超聲清洗?。
復(fù)雜樣品:建議加裝保護柱攔截污染物?。
?儀器維護?
定期更換密封圈、濾膜等耗材,清潔進樣器和管路?。
壓力異常時檢查過濾白頭、管路堵塞或泵單向閥污染?
三、常見問題解決
?峰形異常?:拖尾或分叉可能因柱效下降或污染,需清洗或更換保護柱?。
?壓力過高?:排查流動相雜質(zhì)、流路堵塞或方法參數(shù)錯誤?。
?基線漂移?:檢查流動相穩(wěn)定性、溫度波動或檢測器污染?。
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