賽默飛Qubit Flex熒光計是一款用于DNA、RNA和蛋白質(zhì)定量分析的高通量熒光檢測儀器,可同時測量多達8個樣本。以下是其操作使用指南:
一、Qubit Flex熒光計特點
1、高通量檢測:Qubit Flex可同時檢測8個樣本,相比單樣本檢測的Qubit 4,可節(jié)省50%的時間。
2、高靈敏度和特異性:采用熒光染料法,僅結(jié)合目標分子(如dsDNA、RNA、蛋白質(zhì))時才會發(fā)出信號,減少雜質(zhì)干擾。
3、內(nèi)置計算器:包括試劑計算器、檢測范圍計算器、摩爾濃度計算器和歸一化計算器,幫助優(yōu)化實驗流程。
4、數(shù)據(jù)管理:可存儲10,000個樣本數(shù)據(jù),支持通過Wi-Fi、USB或以太網(wǎng)導(dǎo)出數(shù)據(jù)。
二、Qubit Flex熒光計操作流程
1、加載樣本:
使用Qubit Flex八聯(lián)管條(200 μL薄壁聚丙烯管)。
每個樣本需1–20 μL,檢測限可達10 pg/μL DNA或12.5 μg/mL蛋白質(zhì)。
2、校準:
可選擇運行新校準或使用上次保存的校準數(shù)據(jù)。
校準可在檢測管區(qū)域進行,無需單獨校準8個管子(需固件版本≥1.5.0)。
3、檢測:
檢測時間約3秒/樣本。
蛋白質(zhì)樣品需孵育15分鐘,核酸樣品孵育2分鐘后讀數(shù)。
4、數(shù)據(jù)分析
結(jié)果可顯示為標準曲線或列表形式,支持圖表導(dǎo)出。
可通過Wi-Fi上傳至Thermo Fisher Connect云平臺,或通過USB/以太網(wǎng)傳輸至計算機。
三、注意事項
1、讀數(shù)穩(wěn)定性:避免反復(fù)讀取同一管,因加熱可能導(dǎo)致信號降低。如需重復(fù)測量,取出管子冷卻30秒后再測。
2、去垢劑影響:Qubit Protein Assay可耐受少量去垢劑(≤5%),具體參考試劑盒手冊。
3、與NanoDrop對比:Qubit讀數(shù)通常低于紫外吸收法(如NanoDrop),因其僅檢測目標分子,而非總核酸。
四、維護與支持
1、光源壽命:LED光源預(yù)計可使用5年。
2、固件升級:如需21 CFR Part 11合規(guī)支持,需升級至SAE模式(固件≥1.7.0)。
3、系統(tǒng)驗證:可使用Qubit Flex系統(tǒng)驗證檢測試劑盒定期檢查儀器性能。
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