植物細(xì)胞組織培養(yǎng),如食用菌生產(chǎn)、桉樹苗接種等操作對生產(chǎn)環(huán)境的要求較高,因此在操作和培養(yǎng)過程中,最重要的是防止細(xì)菌等的感染,無菌設(shè)備非常重要。按照國外的經(jīng)驗(yàn),一般植物組培實(shí)驗(yàn)室和生產(chǎn)車間應(yīng)該是在無菌環(huán)境下生產(chǎn),但由于無菌室建造及運(yùn)行、維護(hù)成本較高,目前在國內(nèi)還不能廣泛普及。國內(nèi)主要目前采用的是局部凈化,超凈工作臺已經(jīng)成為了,組培超凈工作臺目前已經(jīng)廣泛應(yīng)用于植物組培,實(shí)驗(yàn)室,食用菌生產(chǎn)等環(huán)境。部分食用菌組培采用流水線接種超凈臺,稱之為流水線超凈臺。
無菌室主要用于植物材料的消毒、接種、培養(yǎng)物的繼代轉(zhuǎn)移等。這里是植物組織培養(yǎng)研究中最關(guān)鍵的部分,關(guān)系到培養(yǎng)物的污染率.接種工作教率等重要指標(biāo)要求地面、天花板、四壁盡可能光潔、無塵,易于采取各種清沽和消毒措施。
接種無菌室一般設(shè)內(nèi)外兩間,外間小些為準(zhǔn)備室(供操作人員更換工作服、工作帽、拖鞋,洗手及處理外界采樣準(zhǔn)備,更衣洗手消毒后進(jìn)入風(fēng)淋室,把進(jìn)入車間的人員身的灰塵吹掉,避免員工將毛發(fā)等帶入車間。然后通過傳遞窗將無菌培養(yǎng)材料殺菌后送入接種室,以防止帶人病菌,保證無菌室能長時(shí)間和大量進(jìn)行無菌操作)。內(nèi)間稍大,供接種用。
無苗室內(nèi)應(yīng)安有紫外線殺菌燈或臭氧發(fā)生器,在操作前至少開燈20min。同時(shí)室內(nèi)應(yīng)定期用甲醛和高錳酸鉀蒸氣熏蒸(或用70%酒精或0.5%苯酚嘖霧降塵和消毒)。無菌操作室需備有固定式載物臺、移動式載物臺、廣口瓶、酒精燈、酒精棉、器械支架、手術(shù)剪、解剖刀、解剖針、鑷子等用于接種。近年來,多數(shù)實(shí)驗(yàn)室都采用超凈工作臺來代替無菌操作室。超凈工作臺不僅操作方便,而且效果也很好。
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