一,基本原理
1.紫外-可見吸收光譜的形成
吸光光度法也稱做分光光度法,但是分光光度法的概念有些含糊,分光光度是指儀器的功能,即儀器進(jìn)行分光并用光度法測(cè)定,這類儀器包括了分光光度計(jì)與原子吸收光譜儀(AAS)。吸光光度法的本質(zhì)是光的吸收,因此稱吸光光度法比較合理,當(dāng)然,稱分子吸光光度法是zui確切的。
紫外-可見吸收光譜是物質(zhì)中分子吸收200-800nm光譜區(qū)內(nèi)的光而產(chǎn)生的。這種分子吸收光譜產(chǎn)生于價(jià)電子和分子軌道上的電子在電子能級(jí)躍遷(原子或分子中的電子,總是處在某一種運(yùn)動(dòng)狀態(tài)之中。每一種狀態(tài)都具有一定的能量,屬于一定的能級(jí)。這些電子由于各種原因(如受光、熱、電的激發(fā))而從一個(gè)能級(jí)轉(zhuǎn)到另一個(gè)能級(jí),稱為躍遷。)當(dāng)這些電子吸收了外來輻射的能量就從一個(gè)能量較低的能級(jí)躍遷到一個(gè)能量較高的能級(jí)。因此,每一躍遷都對(duì)應(yīng)著吸收一定的能量輻射。具有不同分子結(jié)構(gòu)的各種物質(zhì),有對(duì)電磁輻射顯示選擇吸收的特性。吸光光度法就是基于這種物質(zhì)對(duì)電磁輻射的選擇性吸收的特性而建立起來的,它屬于分子吸收光譜。躍遷所吸收的能量符合波爾條件:
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