感受態(tài)專題：細胞瞬時轉(zhuǎn)染

來源：上海北諾生物科技有限公司 2013年11月06日 12:38

原理：

通過脂質(zhì)體介導轉(zhuǎn)染法及電穿孔等基因轉(zhuǎn)染技術(shù)，將靶基因?qū)爰毎?，一般在轉(zhuǎn)染后48小時左右，靶基因即可在細胞內(nèi)表達。根據(jù)不同的實驗?zāi)康模?8小時后即可進行靶基因表達的檢測等實驗。

應(yīng)用：

觀察目的基因及其表達蛋白在某種細胞中的功能（短時間即可進行觀察，但效應(yīng)會很快丟失）。

一般流程：

1）細胞接種：轉(zhuǎn)染實驗前天接種細胞，各種細胞的平板密度依據(jù)各種細胞的生長率和細胞形狀而定。進行轉(zhuǎn)染當天細胞密度應(yīng)達到60%~80%覆蓋。

2）細胞轉(zhuǎn)染（脂質(zhì)體、電穿孔、FuGENE6等）

3）48小時以后鑒定目的基因的表達情況。

前期準備：

l構(gòu)建好的外源基因載體，或目的基因基本信息。

l待轉(zhuǎn)染的細胞系（1×106個細胞，可傳代，倍增時間小于48小時）以及細胞培養(yǎng)條件的說明。

l若需要檢測靶基因的表達，請?zhí)峁┫鄳?yīng)抗體。

結(jié)果呈現(xiàn)：

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