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研域（上海）化學(xué)試劑有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第18年
ELISA試劑盒應(yīng)該如何保存？2023/10/25
ELISA實(shí)驗(yàn)是一種敏感性高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡(jiǎn)便，結(jié)果判斷較客觀(guān)等因索，已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗(yàn)的各域中。ELISA試劑盒應(yīng)該如何保存？保存不當(dāng)會(huì)導(dǎo)致試劑失效或影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果！1、要注意避免出現(xiàn)嚴(yán)重溶血。血紅蛋白中含有血紅索基團(tuán)，其有類(lèi)似過(guò)氧化物的活性，因此，在以HRP為標(biāo)記酶的ELISA測(cè)定中，如血清標(biāo)本中血紅蛋白濃度較高，則其就很容易在溫育過(guò)程中吸附于固相，從而與后面加入的HRP底物反應(yīng)顯色。2、樣本的采集及血清分離中要注意盡量避免細(xì)菌污染，一則細(xì)
ELISA實(shí)驗(yàn)條件重要的選擇2023/10/24
在ELISA中，進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的，其中包括:(1)固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體，在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被，在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng)，觀(guān)察其顯色反應(yīng)是否均一性，據(jù)此判明其吸附性能是否良好。(2)ELISA試劑盒包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時(shí)，要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度，
ELISA實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果和假陰性結(jié)果的原因2023/10/17
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。除了盒子本身質(zhì)量外，操作中很多因素都影響試驗(yàn)的正常結(jié)果。*常出現(xiàn)的問(wèn)題是顯色淡，靈敏度偏低、重復(fù)性不佳、假陽(yáng)性結(jié)果和假陰性結(jié)果，不管出現(xiàn)什么樣的結(jié)果，不但浪費(fèi)客戶(hù)的金錢(qián)、樣本、精力，更重要的是對(duì)臨床做出了危險(xiǎn)判斷。在這里我們分析ELISA試驗(yàn)非正常檢測(cè)結(jié)果產(chǎn)生的常見(jiàn)原因，并探討其解決辦法，以提高檢測(cè)質(zhì)量。1.標(biāo)本的采集與保存當(dāng)標(biāo)本采集保存不當(dāng)產(chǎn)生溶血時(shí)，紅細(xì)胞中的血紅蛋白釋放到血清中，血紅蛋白具有過(guò)氧化物酶的性質(zhì)，其通過(guò)吸附或“PP效應(yīng)”(蛋白質(zhì)間相
研域生物分享elisa實(shí)驗(yàn)時(shí)需要注意的問(wèn)題2023/10/10
elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)以靈敏度較高﹑特異性較好的特點(diǎn)得到了廣泛的應(yīng)用，但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大，如不注意，有可能導(dǎo)致顯色不全﹑花板等結(jié)果。elisa實(shí)驗(yàn)操作所要求的條件是比較嚴(yán)格的，無(wú)論是對(duì)實(shí)驗(yàn)的硬件條件還是對(duì)實(shí)驗(yàn)的操作人員的技術(shù)要求，都是如此。下面研域生物分享10條在進(jìn)行elisa實(shí)驗(yàn)時(shí)需要注意的問(wèn)題。1.要保證移液槍的準(zhǔn)確性，誤差不能超過(guò)2%。可用水和電子天平進(jìn)行確定。但盡量在有專(zhuān)業(yè)人員進(jìn)行矯正。2.要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液
ELISA試劑盒常見(jiàn)液體祥本處理方法2023/09/26
ELISA即酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)，是目前廣泛應(yīng)用于各種抗原抗體檢測(cè)的方法，主要有靈敏度高和特異性強(qiáng)的特點(diǎn)。ELISA操作步驟看似簡(jiǎn)單，整個(gè)測(cè)定過(guò)程中卻有諸多影響因素，導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果可能與實(shí)際結(jié)果偏差較大。ELISA試劑盒常見(jiàn)液體祥本處理方法1、血清:用無(wú)菌管搜集，室溫血液自然凝固10-20分鐘，2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)，細(xì)心搜集上清，保存過(guò)程中如出現(xiàn)堆積，應(yīng)再次離心。2、尿液:用無(wú)菌管搜集，2-8C條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細(xì)心搜集上清，保存過(guò)程
血清影響ELISA實(shí)驗(yàn)假陽(yáng)怎么辦？2023/09/19
人血清中IgM、IgG型類(lèi)風(fēng)濕因子(RF）可以與ELISA系統(tǒng)中的捕獲抗體及酶標(biāo)記二抗的FC段直接結(jié)合，從而導(dǎo)致假陽(yáng)性。要怎樣解決呢？請(qǐng)看以下操作。①用F(ab)2替代完整的IzG;②標(biāo)本用聯(lián)有熱變性(63C，10nin)IgG的固相吸附劑處理(將熱變性IgG加入到標(biāo)本稀釋液中同樣有效);檢測(cè)抗原時(shí)，可以用2-疏基乙酸等加入到標(biāo)本稀釋液中，使RF降解。(2)補(bǔ)體ELISA&系統(tǒng)中固相一抗和標(biāo)記二抗過(guò)程中，抗體分子發(fā)生變構(gòu)，其FC段的補(bǔ)體C1q分子結(jié)合位點(diǎn)被暴露出來(lái)，使C1q可以將二者連接起來(lái)，從
您知道ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)時(shí)洗滌的重要注意事項(xiàng)嗎？2023/09/12
洗滌是ELISA實(shí)驗(yàn)中是最多次數(shù)的操作，也是非常重要的步驟。不嚴(yán)格的洗滌容易出現(xiàn)洗不干凈或交又污染現(xiàn)象，實(shí)驗(yàn)重復(fù)效果差的現(xiàn)象。不管用多道加樣器、洗瓶、吸管，還是洗板機(jī)，嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)操作不要減少步驟洗滌的洗滌體積、洗滌時(shí)間和洗滌次數(shù)。注意標(biāo)準(zhǔn)化操作將減少實(shí)驗(yàn)誤差和不同實(shí)驗(yàn)之間的誤差。操作者常出現(xiàn)洗板不干凈現(xiàn)象，請(qǐng)比照“手工洗板小貼士”操1.洗液不要溢出孔外，以免污染相鄰的孔，特別是每次洗板的前兩遍，若高濃度的孔污染了低濃度的孔或空白孔，其造成的交叉污染的孔是洗不掉的，背景肯定會(huì)增高。2.特別注意
影響ELISA試劑盒靈敏度常出現(xiàn)的問(wèn)題及解決辦法2023/09/05
ELISA試劑盒試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在臨床上得到了廣泛的應(yīng)用，但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大，如不注意，有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。上海研域生物將操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)一下，以期給同行帶來(lái)—些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。1、超過(guò)有效期。試劑盒必須在有效期內(nèi)使用，超過(guò)有效期的產(chǎn)品可能會(huì)產(chǎn)生很弱的信號(hào)。2、試劑盒沒(méi)有按規(guī)定進(jìn)行保存，受高溫影響。3、試劑、樣品用前未平衡至室溫4、加入試劑的體積和時(shí)間有誤，移液器計(jì)量不準(zhǔn)，吸嘴內(nèi)水分太多或不清潔。5、洗板及加樣
如何挑選適合實(shí)驗(yàn)的ELISA試劑盒之實(shí)驗(yàn)類(lèi)型2023/08/22
ELISA是一種廣泛應(yīng)用于大分子蛋白和小分子激素定量檢測(cè)的免疫診斷技術(shù)。ELISA實(shí)驗(yàn)操作雖然不算復(fù)雜，但也有許多需要注意的事項(xiàng)。各個(gè)環(huán)節(jié)稍有不慎，就可能對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生影響。ELISA試劑盒有多種類(lèi)型，不過(guò)它們都有一個(gè)共同特點(diǎn)，就是進(jìn)行抗原捕獲。一般捕獲形式包括將抗原吸附到微孔板或者用微孔板上的抗體進(jìn)行捕獲。In-cellELISA和酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)ELISPoT是兩種特殊的類(lèi)型，In-cellELISA需要將微孔板中培養(yǎng)的細(xì)胞進(jìn)行固定和通透化，然后再用抗體原位檢測(cè)。ELISPoT有點(diǎn)像蛋白印跡We
上海研域-ELISA試劑實(shí)驗(yàn)細(xì)節(jié)盤(pán)點(diǎn)2023/08/15
ELISA細(xì)節(jié)盤(pán)點(diǎn)1.樣本收集每個(gè)標(biāo)本量收集體積=100ulx檢測(cè)指標(biāo)，如要做復(fù)孔，標(biāo)本量收集體積=10Oul×檢測(cè)指標(biāo)×2。對(duì)收集后當(dāng)天進(jìn)行檢測(cè)的標(biāo)本，儲(chǔ)存在4℃?zhèn)溆?，如有特殊原因需要周期收集?biāo)本，將標(biāo)本及時(shí)分裝后放在-20°℃或-70°℃條件下保存，避免反復(fù)凍融。標(biāo)本2-8℃可保存48小時(shí)，-20°℃可保存1個(gè)月。-70度可保存6個(gè)月。部分激素類(lèi)標(biāo)本需添加抑肽酶。如需離心的樣本，離心轉(zhuǎn)速不宜過(guò)高(2000~3000)2.ELISA加樣加樣品時(shí)，單孔用量要求:≥50ul/指標(biāo)，如需要做2個(gè)復(fù)孔
關(guān)于elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)中保存抗原的操作細(xì)節(jié)分析2023/08/01
ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中每一個(gè)步驟都尤為重要，細(xì)節(jié)不容忽視，它是實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵與否﹔在這里研域生物為方便各位了解，更好的完成實(shí)驗(yàn)，特對(duì)ELISA試劑盒操作步驟中保存抗原做出以下分析，供大家參考:1、包被原的性質(zhì)很重要，蛋白濃度，是否降解，這關(guān)系到你做出的抗體可不可以被其識(shí)別，所以保存抗原很重要。有的包被原可能不是蛋白，對(duì)于生物素和脂類(lèi)物質(zhì)或小分子物質(zhì)我們要事先對(duì)其改造再加以包被，方法如下:①親和素生物素:先親和素先包被載體，加入生物素化的DNA，這種包被方法均勻、牢固，已擴(kuò)大應(yīng)用于各種抗原物質(zhì)的定
洗滌是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵2023/07/25
ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn))是目前臨床上常用的免疫學(xué)檢驗(yàn)方法,由于其試劑穩(wěn)定,易保存,操作簡(jiǎn)便,結(jié)果判斷較客觀(guān),既適宜于大規(guī)模篩查試驗(yàn),又可用于少量標(biāo)本的檢測(cè),既可以做定性試驗(yàn)也可以做定量分析,目前已廣泛用于微生物學(xué),寄生蟲(chóng)學(xué),腫瘤學(xué)和細(xì)胞因子檢測(cè)等領(lǐng)域.EUSA有敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的特點(diǎn),但其同時(shí)存在影響因素多的不足,現(xiàn)就實(shí)驗(yàn)操作中常見(jiàn)的影響因素進(jìn)行分析實(shí)驗(yàn),以提高ELASA的實(shí)驗(yàn)質(zhì)量.洗滌在ELISA過(guò)程中不是反應(yīng)聚，但卻是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。洗滌的目的是洗去反應(yīng)液中沒(méi)有與固相抗
ELISA檢測(cè)試劑盒如何避免假陽(yáng)性現(xiàn)象2023/07/20
ELISA檢測(cè)試劑盒如何避免假陽(yáng)性現(xiàn)象。1、加樣對(duì)于間接進(jìn)口ELISA檢測(cè)試劑盒標(biāo)本一般都要進(jìn)行稀釋?zhuān)绻訕硬粶?zhǔn)就會(huì)造成誤差，尤其當(dāng)稀釋倍數(shù)大時(shí)，很小的絕對(duì)誤差，會(huì)導(dǎo)致較大的相對(duì)誤差，使陰性（或弱陽(yáng)性）標(biāo)本呈陽(yáng)性（或陰性）。加樣時(shí)應(yīng)將所加物加在ELISA板孔的底部，避免加在孔壁上部，并注意不可濺出，不可產(chǎn)生氣泡。目前，大部分血站都已使用全自動(dòng)酶免加樣系統(tǒng)處理標(biāo)本，可較好地避免以上誤差。2、洗滌在進(jìn)口ELISA檢測(cè)試劑盒中正確的洗滌是保證得到可重復(fù)結(jié)果的關(guān)健一步，應(yīng)引起操作者重視。無(wú)論是手工操作
上海研域帶您了解ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)詳細(xì)步驟2023/07/18
ELISA是酶聯(lián)接免疫吸附劑測(cè)定(Enzyme-LinkedImmunosorbnentAssay)的簡(jiǎn)稱(chēng)。它是繼免疫熒光和放射免疫技術(shù)之后發(fā)展起來(lái)的一種免疫酶技術(shù)。ELISA試劑盒包含預(yù)包被酶標(biāo)板、檢測(cè)抗體、鏈酶親和素標(biāo)記的HRP、標(biāo)準(zhǔn)品、標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液、TMB顯色液、終止液、洗液、封板膜、檢測(cè)緩沖液等10個(gè)成分。實(shí)驗(yàn)前，請(qǐng)將試劑盒、樣本取出；室溫放置半小時(shí)，恢復(fù)至室溫。第一步：ELISA緩沖液配制吸取5毫升10xAssayBuffer緩沖液，至50ml離心管，吸取50ml20x洗液至1升量筒，
ELISA實(shí)驗(yàn)步驟及注意事項(xiàng)2023/07/11
ELISA實(shí)驗(yàn)步驟及注意事項(xiàng):1、固相載體選擇聚苯乙烯：具有較強(qiáng)的吸附蛋白質(zhì)的性能，抗體或抗原吸附其上后仍保留原來(lái)的免疫學(xué)活性。聚氯乙烯：聚氯乙烯對(duì)蛋白質(zhì)的吸附性能比聚苯乙烯高，但空白值也略高溫物。良好的ELISA板應(yīng)該是吸附性能好，空白值低，孔底透明度高，各板之間、同一板各孔之間性能相近。2、包被①板孔的選擇：ELISA配套的微孔板。②抗體選擇：何針選擇支持ELISA實(shí)驗(yàn)的抗體，根據(jù)推薦濃度稀釋或摸索最適濃度。③包被緩沖液：pH9.6碳酸鹽緩沖液或pH7.2磷酸鹽緩沖液。④包被溫度：2-8℃過(guò)
ELISA試劑盒需把握的關(guān)鍵有哪些？2023/06/28
ELISA實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記，其中，結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性，酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性，又保留酶的活性。進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，樣品中的受檢物質(zhì)(抗原或抗體）與固定的抗體或抗原結(jié)合。通過(guò)洗板除去非結(jié)合物，再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體，此時(shí)，能固定下來(lái)的酶量與樣品中被檢物質(zhì)的量相關(guān)。通過(guò)加入與酶反應(yīng)的底物后顯色，根據(jù)顏色的深淺可以判斷樣品中物質(zhì)的含量，進(jìn)行定性或定量的分析。由于酶的催化效率很高，間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果，使測(cè)定方法達(dá)到很高的靈敏
ELISA試劑盒抗原抗體反應(yīng)2023/06/20
1可逆性Ag·Ab的解離程度與K值有關(guān)。高親和力抗體的抗原結(jié)合點(diǎn)與抗原的決定簇在空間構(gòu)型上非常適合，兩者結(jié)合牢固，不易解離。解離后的抗原或抗體均能保持原有的結(jié)構(gòu)和活性，因此可用親和層析法來(lái)提純抗原或抗體。在抗血清中，特異性的IgG抗體僅占總IgG中的極小部分。用親和層析法提取的特異性抗體，稱(chēng)為親和層析純抗體，應(yīng)用于免疫測(cè)定中可得到更好的效果。2合適比例在恒定量的抗體中加入遞增量的抗原形成抗體復(fù)合物(沉淀)的量見(jiàn)圖1-4。曲線(xiàn)的高峰部分是抗原抗體比例合適的范圍，稱(chēng)為等價(jià)帶(zoneofequiva
PCR實(shí)驗(yàn)出現(xiàn)凝膠涂布貨片狀條帶彌散的原因2023/06/13
PCR：聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PolymeraseChainReaction,PCR）,一種用于放大擴(kuò)增特定的DNA片段的分子生物學(xué)技術(shù)，它可看作是生物體外的特殊DNA復(fù)制，PCR的大特點(diǎn)，是能將微量的DNA大幅增加。PCR的原理：PCR的基本過(guò)程類(lèi)似于DNA的天然復(fù)制，特異性依賴(lài)于與靶序列兩端互補(bǔ)的Oligo引物。整個(gè)過(guò)程由變性-退火-延伸3個(gè)基本反應(yīng)步驟構(gòu)成。PCR實(shí)驗(yàn)中擴(kuò)增產(chǎn)物在凝膠中涂布或成片狀條帶彌散的原因如下：（1）酶量過(guò)高。減少酶量；酶的質(zhì)量差，調(diào)換另一來(lái)源的酶。（2）dNTP濃度過(guò)高。
常溫細(xì)胞處理方式2023/06/06
細(xì)胞（Cells）是由英國(guó)科學(xué)家羅伯特·胡克（RobertHooke，1635～1703）于1665年發(fā)現(xiàn)的。當(dāng)時(shí)他用自制的光學(xué)顯微鏡觀(guān)察軟木塞的薄切片，放大后發(fā)現(xiàn)一格一格的小空間，[1]就以英文的cell命名之，而這個(gè)英文單字的意義本身就有小房間一格一格的用法，所以并非另創(chuàng)的字匯。當(dāng)收到了常溫的細(xì)胞，正確的處理方式應(yīng)該是怎樣的。一、首先，觀(guān)察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。二、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題，部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量叢瓶壁脫落;先
ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)廢液的正確處理方法2023/05/30
ELISA試劑盒在國(guó)內(nèi)有許多種叫法，例如：ELISA檢測(cè)試劑盒、ELISAKit、酶聯(lián)免疫試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒、酶聯(lián)免疫分析試劑盒、酶免試劑盒等，比較常見(jiàn)的叫法是ELISA檢測(cè)試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒等。ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)之后，為達(dá)到對(duì)環(huán)境的維護(hù)，研域生物特別告訴您：實(shí)驗(yàn)廢液的正確處理方法。1.存放廢液的專(zhuān)用桶必須遠(yuǎn)離電源、氣源、火源，采取嚴(yán)格的安全措施。2.必須倒入專(zhuān)用的收集桶內(nèi)，嚴(yán)禁倒入下水道。3.凡存放廢液的桶上必須用標(biāo)簽紙標(biāo)明所存廢液的主要成分名稱(chēng)。4.嚴(yán)禁將化學(xué)試劑瓶
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