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上海佰利萊生物科技有限公司
初級(jí)會(huì)員 | 第4年
有關(guān)實(shí)驗(yàn)中影響ELISA標(biāo)本的內(nèi)源性物質(zhì)詳解2024/04/01
血清是常用的ELISA實(shí)驗(yàn)標(biāo)本,血漿一般可視為與血清同等的標(biāo)本,標(biāo)本引起的假陽(yáng)性和假陰性結(jié)果主要是干擾性物質(zhì)所致,影響的內(nèi)源性物質(zhì)具體講解如下:首先有人認(rèn)為大約40%的人血清標(biāo)本中含有非特異性干擾物質(zhì),它可以不同程度影響檢測(cè)結(jié)果。然而常見(jiàn)的干擾物質(zhì)有:類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、嗜異性抗體、嗜靶抗原自身抗體、醫(yī)源性誘導(dǎo)的抗鼠Ig(s)抗體、交叉反應(yīng)物質(zhì)和其它物質(zhì)等。因此我們根據(jù)這幾種物質(zhì)來(lái)詳細(xì)解說(shuō)下:1、類風(fēng)濕因子人血清中IgM、IgG型類風(fēng)濕因子(RF)可以與ELISA系統(tǒng)中的捕捉抗體及酶標(biāo)記二抗的FC
ELISA實(shí)驗(yàn)前需要準(zhǔn)備哪些儀器和試劑2024/03/22
ELISA技術(shù)自20世紀(jì)70年代初問(wèn)世以來(lái),發(fā)展非常迅速,目前被廣泛應(yīng)用于免疫學(xué)、醫(yī)學(xué)、生物學(xué)等許多領(lǐng)域。其基本原理是根據(jù)抗原或抗體能在一定條件下結(jié)合到固相載體的表面仍保持其免疫活性,抗原或抗體與酶結(jié)合形成的結(jié)合物仍能保持免疫學(xué)和酶的活性。結(jié)合物與相應(yīng)的抗原、抗體結(jié)合后,可根據(jù)加入相應(yīng)的酶底物的顏色反應(yīng)來(lái)判斷有無(wú)相應(yīng)的免疫反應(yīng),而且顏色的深淺與相應(yīng)的抗原或抗體的量在一定的范圍內(nèi)成正比。由于抗原、抗體的反應(yīng)在1種固相載體——聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行,每加入一種試劑孵育后,可通過(guò)洗滌除去多余的游
白介素ELISA試劑盒標(biāo)本保存會(huì)遇到哪些問(wèn)題?2024/03/22
白介素ELISA試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)技術(shù)。特異性抗人IL-1α單克隆抗體預(yù)包被在高親和力的酶標(biāo)板上。酶標(biāo)板孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測(cè)樣本和sheng物素化的檢測(cè)抗體,經(jīng)過(guò)孵育,樣本中存在的IL-1α與固相抗體和檢測(cè)抗體結(jié)合。洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)后,加入辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的鏈霉親和素(streptavidin-HRP)。洗滌后,加入顯色底物TMB,避光顯色。顏色反應(yīng)的深淺與樣本中IL-1α的濃度成正比。加入終止液終止反應(yīng),在450nm波長(zhǎng)(參考波長(zhǎng)570-630nm)測(cè)定吸光度值。白介素
組織培養(yǎng)細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)2024/03/22
組織培養(yǎng)細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)與體內(nèi)細(xì)胞基本相同,但在大體形態(tài)以及某些細(xì)微結(jié)構(gòu)方面仍存在著一定的差異。一、形態(tài)分類根據(jù)細(xì)胞是否貼附于支持物上生長(zhǎng),形態(tài)有所不同。呈懸浮生長(zhǎng)時(shí),不論細(xì)胞原來(lái)源于體內(nèi)何種類型細(xì)胞,由于生長(zhǎng)在液體環(huán)境中,胞體基本呈圓形。大多數(shù)細(xì)胞是貼附型生長(zhǎng)的。當(dāng)細(xì)胞貼附在支持物上后,細(xì)胞分化現(xiàn)象常變得不顯著,易失去它們?cè)隗w內(nèi)時(shí)的原有特征,在形態(tài)上表現(xiàn)單一化的現(xiàn)象。貼附于支持物表面后,開(kāi)始仍為圓形,但為時(shí)很短,很快便經(jīng)過(guò)形態(tài)演變過(guò)渡成扁平形態(tài)。1.成纖維細(xì)胞型:此細(xì)胞形態(tài)與體內(nèi)成纖維細(xì)胞的相似而
ELISA方法測(cè)定單克隆抗體實(shí)驗(yàn)原理及操作步驟2024/03/18
ELISA方法測(cè)定單克隆抗體實(shí)驗(yàn)原理及操作步驟一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.深入了解ELISA法測(cè)定抗體效價(jià)的原理。2.掌握ELISA法測(cè)定單克隆抗體效價(jià)的方法。二、實(shí)驗(yàn)原理ELISA是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的gao效催化作用相結(jié)合起來(lái)的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)。免疫酶技術(shù)是將酶標(biāo)記在抗體/抗原分子上,形成酶標(biāo)抗體/酶標(biāo)抗原,稱為酶結(jié)合物。該酶結(jié)合物的酶在免疫反應(yīng)后,作用于底物使之呈色,根據(jù)顏色的有無(wú)和深淺,定位或定量抗原/抗體。ELISA法是免疫酶技術(shù)的一種,其特點(diǎn)是利用聚苯
佰利萊生物給大家總結(jié)一下ELISA篩選及注意事項(xiàng)2024/03/14
如何利用ELISA篩選以及ELISA方法操作的注意事項(xiàng)有哪些呢?相信很多做實(shí)驗(yàn)的小伙伴都有這樣的疑問(wèn),佰利萊生物就給大家總結(jié)一下;ELISA,全稱酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn),主要利用的是抗原抗體特異性結(jié)合的特點(diǎn),可分為植接法、間接法、雙抗體夾心法、競(jìng)爭(zhēng)法等。下面以間接法為例進(jìn)行介紹:一、方陣ELISA。用途:(1)融合后確定鼠血清中抗體效價(jià);(2)拿到單抗腹水后,需要建立ELISA方法時(shí)先要確定包被原及抗體的優(yōu)質(zhì)工作濃度。經(jīng)典的方陣ELISA:將抗原和抗體各自稀釋成不同梯度濃度,結(jié)果OD值P/N2的均判為
關(guān)于細(xì)胞為什么會(huì)衰老,怎么可以檢測(cè)出來(lái)2024/03/04
◆細(xì)胞為什么會(huì)衰老:1、過(guò)量的大分子交聯(lián)是衰老的一個(gè)主要因素,如DNA交聯(lián)和膠原膠聯(lián)均可損害其功能,引起衰老。2、細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累至—定量后會(huì)危害細(xì)胞,導(dǎo)致細(xì)胞的衰老。3、自由基含有未配對(duì)電子,具有高度反應(yīng)活性,可引發(fā)鏈?zhǔn)阶杂苫磻?yīng),引起DNA、蛋白質(zhì)和脂類,尤其是多不飽和脂肪酸等大分子物質(zhì)變性和交聯(lián),損傷DNA、生物膜和重要的結(jié)構(gòu)蛋白和功能蛋白,從而引起衰老各種現(xiàn)象的發(fā)生。4、存在于細(xì)胞內(nèi)部提供能量的線粒體,其遺傳基因很容易發(fā)生突變,變異的積累很可能是人體老化的原因之—。細(xì)胞衰老是細(xì)胞在正常環(huán)
丙酮酸脫羧酶(PDC ) 活性測(cè)定試劑盒說(shuō)明書(shū) 紫外分光光度法2024/02/18
規(guī)格:50管/48樣丙酮酸脫羧酶(pyruvatedecarboxylase,PDC)活性測(cè)定試劑盒說(shuō)明書(shū)紫外分光光度法注意:正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。測(cè)定意義:PDC主要存在于酵母中,是乙醇發(fā)酵的關(guān)鍵酶之一,催化丙酮酸脫羧生成乙醛。測(cè)定原理:PDC催化丙酮酸脫羧生成乙醛,添加乙醇脫氫酶(ADH)來(lái)進(jìn)一步催化NADH還原乙醛生成乙醇和NAD+;NADH在340nm有吸收峰,而NAD+沒(méi)有;通過(guò)測(cè)定340nm光吸收下降速率,來(lái)計(jì)算PDC活性。自備儀器和用品:研缽、冰、臺(tái)式離
植物(Plant)5-甲基-四氫葉酸(5-CH3-THF) ELISA檢測(cè)試劑盒 使用說(shuō)明書(shū)2024/01/15
本試劑盒只能用于科學(xué)研究,不得用于醫(yī)學(xué)診斷植物(Plant)5-甲基-四氫葉酸(5-CH3-THF)ELISA檢測(cè)試劑盒使用說(shuō)明書(shū)檢測(cè)原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被5-甲基-四氫葉酸(5-CH3-THF)抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過(guò)溫育并徹-底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的5-甲基-四氫葉酸(5-CH3-THF)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在4
植物(Plant)質(zhì)膜氫-ATP酶(H+-ATPase) ELISA檢測(cè)試劑盒 使用說(shuō)明書(shū)2023/12/29
本試劑盒只能用于科學(xué)研究,不得用于醫(yī)學(xué)診斷植物(Plant)質(zhì)膜氫-ATP酶(H+-ATPase)ELISA檢測(cè)試劑盒使用說(shuō)明書(shū)檢測(cè)原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被質(zhì)膜氫-ATP酶(H+-ATPase)抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過(guò)溫育并徹-底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的質(zhì)膜氫-ATP酶(H+-ATPase)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450n
ELISA實(shí)驗(yàn)加樣時(shí)產(chǎn)生氣泡的原因及注意的細(xì)節(jié)2023/12/11
ELISA實(shí)驗(yàn)加樣時(shí)通常氣泡都是聚集在酶標(biāo)板的孔周圍,導(dǎo)致孔中液體不能與孔壁有效接觸,使孔內(nèi)反應(yīng)不均一。很多說(shuō)明書(shū)、教科書(shū)上也都提到,加樣時(shí)要避免出現(xiàn)氣泡,這到底是什么原因呢?因?yàn)樵谧鰧?shí)驗(yàn)的過(guò)程中,有時(shí)為了打干凈槍頭里面的液體,很容易產(chǎn)生氣泡,是不是這樣對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果會(huì)后什么影響?原因:1.通常氣泡都是聚集在酶標(biāo)板的孔周圍,導(dǎo)致孔中液體不能與孔壁有效接觸,使孔內(nèi)反應(yīng)不均一。2.包被時(shí)有氣泡的話,將導(dǎo)致包被不完-全實(shí)際包被里下降―–弱陽(yáng)性甚至假陰性。3.封閉時(shí)有氣泡的話,將導(dǎo)致大里未結(jié)合位點(diǎn)的存在,引
ELISA試劑盒液體樣本處理方法2023/12/11
ELISA試劑盒常見(jiàn)液體樣本處理方法1、血清:用無(wú)菌管搜集,室溫血液自然凝固10-20分鐘,2-8C條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分〉,細(xì)心搜集上清,保存過(guò)程中如出現(xiàn)堆積,應(yīng)再次離心。2、尿液:用無(wú)菌管搜集,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細(xì)心搜集上清,保存過(guò)程中如有堆積構(gòu)成,應(yīng)再次離心。3、血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求挑選EDT、肝-素-鈉或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,2-C條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),細(xì)心搜集上清,保存過(guò)程
牛朊病毒 (Prion) ELISA檢測(cè)試劑盒 說(shuō)明書(shū)2023/11/22
本試劑盒只能用于科學(xué)研究,不得用于醫(yī)學(xué)診斷牛(Bovine)朊病毒(Prion)ELISA檢測(cè)試劑盒使用說(shuō)明書(shū)檢測(cè)原理試劑盒采用雙抗一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被朊病毒抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗原,經(jīng)過(guò)溫育并徹-底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),與CUTOFF值相比較,從而判定標(biāo)本中朊病毒(Prion)的存在與否。樣品收集、處理及保存方法1.
人催乳素抑制激素(PIH)ELISA檢測(cè)試劑盒 使用說(shuō)明書(shū)2023/11/13
本試劑盒只能用于科學(xué)研究,不得用于醫(yī)學(xué)診斷人(Human)催乳素抑制激素(PIH)ELISA檢測(cè)試劑盒使用說(shuō)明書(shū)檢測(cè)原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被催乳素抑制激素(PIH)抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過(guò)溫育并徹-底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的催乳素抑制激素(PIH)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),計(jì)算樣品濃度。
人I型原膠原N端前肽(PINP) ELISA試劑盒 使用說(shuō)明書(shū)2023/10/24
本試劑盒只能用于科學(xué)研究,不得用于醫(yī)學(xué)診斷人(Human)I型原膠原N端前肽(PINP)ELISA檢測(cè)試劑盒使用說(shuō)明書(shū)檢測(cè)原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被I型原膠原N端前肽(PINP)抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過(guò)溫育并徹-底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的I型原膠原N端前肽(PINP)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值
人性別決定區(qū)Y蛋白(SRY) ELISA檢測(cè)試劑盒 使用說(shuō)明書(shū)2023/10/18
本試劑盒只能用于科學(xué)研究,不得用于醫(yī)學(xué)診斷人(Human)性別決定區(qū)Y蛋白(SRY)ELISA檢測(cè)試劑盒使用說(shuō)明書(shū)檢測(cè)原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被性別決定區(qū)Y蛋白(SRY)抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過(guò)溫育并徹-底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的性別決定區(qū)Y蛋白(SRY)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),計(jì)算樣品
人磷酸化Tau217蛋白(p-Tau217) ELISA檢測(cè)試劑盒 使用說(shuō)明書(shū)2023/09/27
本試劑盒只能用于科學(xué)研究,不得用于醫(yī)學(xué)診斷人(Human)磷酸化Tau217蛋白(p-Tau217)ELISA檢測(cè)試劑盒使用說(shuō)明書(shū)檢測(cè)原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被磷酸化Tau217蛋白(p-Tau217)抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過(guò)溫育并徹-底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的磷酸化Tau217蛋白(p-Tau217)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀
細(xì)菌硫雙加氧酶(SDO) ELISA試劑盒 使用說(shuō)明書(shū)2023/09/11
本試劑盒只能用于科學(xué)研究,不得用于醫(yī)學(xué)診斷細(xì)菌(Bacteria)硫雙加氧酶(SDO)ELISA檢測(cè)試劑盒使用說(shuō)明書(shū)檢測(cè)原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被硫雙加氧酶(SDO)抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過(guò)溫育并徹-底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的硫雙加氧酶(SDO)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),計(jì)算樣品活性。樣品
人神經(jīng)絲蛋白L(NFL)ELISA檢測(cè)試劑盒 使用說(shuō)明書(shū)2023/09/05
本試劑盒只能用于科學(xué)研究,不得用于醫(yī)學(xué)診斷人(Human)神經(jīng)絲蛋白L(NFL)ELISA檢測(cè)試劑盒使用說(shuō)明書(shū)檢測(cè)原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被神經(jīng)絲蛋白L(NFL)抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過(guò)溫育并徹-底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的神經(jīng)絲蛋白L(NFL)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),計(jì)算樣品濃度。樣品收
植物油菜素內(nèi)酯(BR)ELISA檢測(cè)試劑盒 使用說(shuō)明書(shū)2023/08/21
本試劑盒只能用于科學(xué)研究,不得用于醫(yī)學(xué)診斷植物(Plant)油菜素內(nèi)酯(BR)ELISA檢測(cè)試劑盒使用說(shuō)明書(shū)檢測(cè)原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被油菜素內(nèi)酯(BR)抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過(guò)溫育并徹-底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的油菜素內(nèi)酯(BR)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),計(jì)算樣品濃度。樣品收集、處理及
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