培安有限公司
【CEM】微波輔助的肽棕櫚酰化:提高合成效率的新策略
檢測(cè)樣品:多肽合成
檢測(cè)項(xiàng)目:肽棕櫚酰化
方案概述:本文詳細(xì)介紹了肽棕櫚?;淖詣?dòng)化微波合成方法,包括實(shí)驗(yàn)步驟、試劑準(zhǔn)備、儀器使用和數(shù)據(jù)分析。通過(guò)優(yōu)化合成參數(shù),成功提高了目標(biāo)肽的純度和產(chǎn)量,并顯著減少了廢物產(chǎn)生,展示了微波技術(shù)在肽合成中的高效性和實(shí)用性。
一、介紹
本程序詳細(xì)說(shuō)明了在0.10毫摩爾規(guī)模下,使用Liberty系列自動(dòng)化微波肽合成儀將棕櫚酸簡(jiǎn)單且高效地偶聯(lián)到N端肽上的方法。
請(qǐng)將此文檔與Liberty手冊(cè)和安全數(shù)據(jù)表(P/N 601400)一起使用。在操作儀器之前,請(qǐng)閱讀并充分理解所有文檔。
注意
必須采取適當(dāng)?shù)念A(yù)防措施,避免接觸試劑或試劑蒸汽。應(yīng)根據(jù)用戶的危險(xiǎn)材料安全程序和試劑制造商的安全數(shù)據(jù)表,佩戴相應(yīng)的防護(hù)裝備。請(qǐng)參考這些指南以正確處理和處置試劑。所有廢棄物的處理應(yīng)符合所有適用的國(guó)家、地區(qū)的健康與安全法規(guī)。
步驟1:編寫微波方法
創(chuàng)建“90°C 6分鐘偶聯(lián)”微波方法
1. 從“編輯”選項(xiàng)卡中,選擇“微波方法”。
2. 選擇以下篩選條件:“0.10”合成規(guī)模和“偶聯(lián)”。
3. 通過(guò)點(diǎn)擊復(fù)制按鈕,創(chuàng)建“標(biāo)準(zhǔn)偶聯(lián)”微波方法的副本。
4. 重命名為“90°C 6分鐘偶聯(lián)”。
5. 編輯“90°C 6分鐘偶聯(lián)”微波方法以使用以下參數(shù)值:
步驟2:使用編程的微波方法
創(chuàng)建循環(huán)創(chuàng)建“0.10-雙90°C 6分鐘偶聯(lián)(高膨脹)”循環(huán)編輯器
1. 從“編輯”選項(xiàng)卡中,選擇“循環(huán)”。
2. 選擇以下篩選條件:“0.10”合成規(guī)模、“氨基酸”和“高膨脹”。
3. 通過(guò)選中并點(diǎn)擊復(fù)制按鈕,創(chuàng)建“0.10-單偶聯(lián)(高膨脹)”的副本。重命名為“0.10-雙90°C 6分鐘偶聯(lián)(高膨脹)”。
4. 編輯“0.10-雙90°C 6分鐘偶聯(lián)(高膨脹)”循環(huán),以使用以下循環(huán)步驟和參數(shù)值:
5.輸入所有循環(huán)步驟和參數(shù)后,選擇“保存”。
步驟3:將循環(huán)應(yīng)用于Liberty方法
1. 從“編輯”選項(xiàng)卡中,選擇“Liberty方法”以創(chuàng)建新的Liberty方法。
2. 在包含棕櫚酸溶液的位置的N端添加一個(gè)值(一個(gè)字母代碼)。
3. 編輯Liberty方法,使用以下方法選項(xiàng):
• C端:根據(jù)樹脂連接子的指示
• 樹脂類型:根據(jù)需要選擇
• 樹脂循環(huán):根據(jù)需要選擇
• 最終脫保護(hù)循環(huán):0.10-無(wú)最終脫保護(hù)
4. 在氨基酸循環(huán)網(wǎng)格中,雙擊棕櫚酸偶聯(lián)的位置,并從下拉菜單中選擇“0.10-90°C 6分鐘雙偶聯(lián)”循環(huán)。
5. 選擇“保存”并關(guān)閉循環(huán)編輯器。
6. 將Liberty方法加載到樹脂指示器位置。
7. 為確保準(zhǔn)備足夠的試劑溶液,選擇“計(jì)算器”選項(xiàng)卡,然后選擇“用量計(jì)算器”。請(qǐng)參閱“步驟4:準(zhǔn)備試劑”以了解重要的試劑制備。
步驟4:準(zhǔn)備試劑
1. 在DMF中制備0.2 M的棕櫚酸溶液,并將其轉(zhuǎn)移到干凈的干燥離心管中。根據(jù)方法指示將其加載到所需位置。
注意:
如果棕櫚酸溶液不易溶解,請(qǐng)進(jìn)行10分鐘的超聲波處理。
2. 稱量所需的樹脂并轉(zhuǎn)移到干凈的反應(yīng)容器中。將反應(yīng)容器固定在衰減器上,然后放入微波腔中。
3. 準(zhǔn)備任何其他必要的試劑,將其加載到儀器上,并開始Liberty方法。
二、案例研究:α-黑色素細(xì)胞刺激激素(CH3(CH2)14CONH-SYSMEHFRWGKPV-NH2)的自動(dòng)化棕櫚?;?/span>
肽合成
使用CEM Liberty Blue自動(dòng)化微波肽合成儀在0.50克Rink酰胺ProTide LL樹脂(0.20毫當(dāng)量/克替代度)上以0.1毫摩爾規(guī)模制備了棕櫚酰化的α-黑色素細(xì)胞刺激激素CH3(CH2)14CONH-SYSMEHFRWGKPV-NH2(圖3)。脫保護(hù)步驟采用20%哌啶的DMF溶液。偶聯(lián)反應(yīng)使用5倍過(guò)量的Fmoc-AA-OH和棕櫚酸,以及1.0 M DIC的DMF溶液和1.0 M Oxyma Pure的DMF溶液進(jìn)行。切割使用CEM Razor高通量肽切割系統(tǒng)進(jìn)行,切割溶液為92.5:2.5:2.5:2.5 TFA/H2O/TIS/DODT。切割后,將肽在Et2O中沉淀并冷凍干燥過(guò)夜。
圖3. 棕櫚酰化的α-黑色素細(xì)胞刺激激素
分析
該肽在配備了Acquity UPLC BEH C8柱(1.7 μm,2.1 x 100 mm)的Thermo Scientific Vanquish UPLC系統(tǒng)上進(jìn)行分析,并使用PDA檢測(cè)器。UPLC系統(tǒng)連接至Thermo Exactive Plus Orbitrap,用于結(jié)構(gòu)測(cè)定。峰分析通過(guò)Thermo Chromeleon軟件完成。分離采用梯度洗脫方法,使用0.1% TFA在(i)水中和(ii)乙腈中進(jìn)行。
結(jié)果與結(jié)論
使用Liberty Blue自動(dòng)化微波肽合成儀進(jìn)行CH3(CH2)14CONH-SYSMEHFRWGKPV-NH2(分子量 = 1861)的微波增強(qiáng)固相肽合成(SPPS),目標(biāo)肽的純度為75%(見圖4和圖5)。總合成時(shí)間為1小時(shí)41分鐘,共產(chǎn)生300毫升廢物。
圖4. CH3(CH2)14CONH-SYSMEHFRWGKPV-NH2的UPLC色譜圖
圖5. CH3(CH2)14CONH-SYSMEHFRWGKPV-NH2在保留時(shí)間5.13分鐘時(shí)的質(zhì)譜圖
相關(guān)產(chǎn)品清單
溫馨提示:
1.本網(wǎng)展示的解決方案僅供學(xué)習(xí)、研究之用,版權(quán)歸屬此方案的提供者,未經(jīng)授權(quán),不得轉(zhuǎn)載、發(fā)行、匯編或網(wǎng)絡(luò)傳播等。
2.如您有上述相關(guān)需求,請(qǐng)務(wù)必先獲得方案提供者的授權(quán)。
3.此解決方案為企業(yè)發(fā)布,信息內(nèi)容的真實(shí)性、準(zhǔn)確性和合法性由上傳企業(yè)負(fù)責(zé),化工儀器網(wǎng)對(duì)此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。
最新解決方案
- 分光光度法測(cè)定3種中草藥中的鎘含量
- 肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞-解鎖肝膽疾病研究與藥物篩選新模型
- 自動(dòng)電位滴定儀測(cè)定無(wú)機(jī)碘水含碘量
- 火焰原子吸收法測(cè)試藥品樣品中的Na含量
- 【文獻(xiàn)分享】Diamonsil C18(2)同時(shí)測(cè)定依巴斯汀口服溶液中抑菌劑及其降解產(chǎn)物
- IPHASE食蟹猴原代細(xì)胞助力藥物代謝研究
- 原代肝細(xì)胞-代謝功能障礙相關(guān)脂肪性肝炎(MASH)研究的核心模型
- 【藥典】中藥- 賽默飛 Hilic 色譜柱與 CAD 檢測(cè)器在中藥配方顆粒寡糖類特征圖譜中的應(yīng)用
- 【藥典】中藥- iCAP RQ ICPMS測(cè)定中藥材中五種重金屬元素
- 迪馬科技色譜柱Platisil ODS讓富馬酸、乳酸、冰乙酸、琥珀酸wanmei分離!
該企業(yè)的其他方案
- 【CEM Oracle脂肪儀應(yīng)用】?jī)?yōu)化玉米加工中的油脂檢測(cè)
- 【ISCO】乙腈與甲醇在反相層析中的替換效果
- 【CEM】按照美國(guó)藥典<233>方法消解難溶API及明膠膠囊
- 【ISCO】丙酮作為乙酸乙酯的替代品在Flash色譜中的應(yīng)用
- 【SPEX】紅辣椒香料和辣醬的重金屬污染
- 【CEM】發(fā)酵乳制品飲料中的蛋白質(zhì)、脂肪和總固體分析
- 【HANSON】不銹鋼和聚偏二氟乙烯槳式攪拌器的比較
- 【CEM】連續(xù)流動(dòng)微波化學(xué)
- 【CEM】寵物食品中?;撬岷康目焖僦苽?/a>
- 【CEM】粉末乳制品及食品成分的快速精確水分分析
業(yè)界頭條
- 三季度創(chuàng)新藥行業(yè)展望:海外授權(quán)與國(guó)內(nèi)放量
-
在全球醫(yī)藥創(chuàng)新的浪潮中,中國(guó)創(chuàng)新藥產(chǎn)業(yè)正處于關(guān)鍵的發(fā)展節(jié)點(diǎn)。今年三季度,創(chuàng)新藥領(lǐng)域呈現(xiàn)出兩個(gè)具潛力的...
- 藥品注冊(cè)檢驗(yàn)新規(guī)8月實(shí)施 樣品縮減時(shí)限加速惠及患者
- 國(guó)產(chǎn)創(chuàng)新藥有望進(jìn)一步實(shí)現(xiàn)銷售放量,建議關(guān)注這些高質(zhì)量創(chuàng)新能力
- 國(guó)家重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃“中醫(yī)藥現(xiàn)代化”重點(diǎn)專項(xiàng)申報(bào)指南發(fā)布
- 創(chuàng)新高!2024年度藥物臨床試驗(yàn)登記總量4900項(xiàng)
- 預(yù)算160萬(wàn)元 大理大學(xué)采購(gòu)一批儀器設(shè)備
- 8藥企預(yù)計(jì)上半年業(yè)績(jī)翻倍增長(zhǎng)!亞太藥業(yè)、特一藥業(yè)凈利增超
- 預(yù)算1.68億元 遼寧中醫(yī)藥大學(xué)采購(gòu)大批儀器設(shè)備