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二甲雙胍、白藜蘆醇和雷帕霉素抑制小鼠肝臟蛋白質(zhì)組的營養(yǎng)性重編程2021/11/25
澳大利亞悉尼大學(xué)StephenJ.Simpson、DavidG.LeCouteur等研究人員合作發(fā)現(xiàn)，二甲雙胍、白藜蘆醇和雷帕霉素抑制小鼠肝臟蛋白質(zhì)組的營養(yǎng)性重編程。該項研究成果于2021年11月11日在線發(fā)表在《細(xì)胞—代謝》雜志上。研究人類通過使用營養(yǎng)幾何框架來揭示了飲食和藥物對小鼠肝臟蛋白質(zhì)組的互動和比較效應(yīng)，這些飲食處理在宏量營養(yǎng)素比例、能量密度和藥物處理（二甲雙胍、雷帕霉素、白藜蘆醇）方面有所不同。飲食能量和剪接體之間有強(qiáng)烈的負(fù)相關(guān)，飲食蛋白質(zhì)和線粒體之間有強(qiáng)烈的正相關(guān)，在高蛋白質(zhì)攝入時
倫理審查與科學(xué)無關(guān)嗎2021/11/10
在本號前文《動物實驗為何要開展倫理審查》中曾提到“在科學(xué)界，部分動物實驗的計劃制定者和實施者也存在著否定、不接受或不關(guān)注科學(xué)研究與動物實驗倫理之間存在關(guān)聯(lián)的事實”。那么動物實驗的倫理審查與科學(xué)或者科學(xué)實驗結(jié)果真的不相干嗎？答案顯然是否定的。我們都知道實驗動物是生命科學(xué)和醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域內(nèi)除了設(shè)備、信息和試劑外的另一個基本要素。隨著現(xiàn)代科技的發(fā)展，科學(xué)家們很容易獲得高精尖的儀器設(shè)備、高精純的化學(xué)試劑和相關(guān)研究領(lǐng)域的情報信息。遺憾的是，科學(xué)家們在實際工作中，往往非常重視設(shè)備、信息和試劑這三個要素，也舍得
冬凌草甲素通過調(diào)控UBC9表達(dá)對肝星狀細(xì)胞增殖、凋亡的影響2021/11/10
目的探討冬凌草甲素對肝星狀細(xì)胞增殖、凋亡的影響和分子機(jī)制。方法采用不同濃度的冬凌草甲素干預(yù)肝星狀細(xì)胞（HSC-T6）48h。分別采用噻唑藍(lán)（MTT）實驗、流式細(xì)胞術(shù)檢測HSC-T6細(xì)胞增殖和凋亡變化。采用實時熒光定量PCR（RT-qPCR）和蛋白質(zhì)印記（Westemblot）檢測泛素結(jié)合酶9（UBC9）表達(dá)變化。轉(zhuǎn)染UBC9小干擾RNA（si-UBC9）下調(diào)HSC-T6細(xì)胞中UBC9表達(dá)水平，采用上述方法檢測細(xì)胞增殖、凋亡變化。結(jié)果冬凌草甲素干預(yù)后，HSC-T6細(xì)胞增殖抑制率、凋亡率顯著升高，U
槲皮素對鎘致小鼠肝臟脂質(zhì)代謝紊亂模型的保護(hù)效應(yīng)2021/11/10
目的探究槲皮素對鎘致小鼠肝損傷的保護(hù)效應(yīng)及機(jī)制。方法C57BL/6J小鼠分為對照組、鎘組（灌胃氯化鎘）、槲皮素組（灌胃槲皮素）、鎘與槲皮素共處理組（灌胃氯化鎘+槲皮素）。給藥結(jié)束后，測定小鼠體質(zhì)量、血清中谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）和谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）活性及血清與肝組織中總膽固醇（TC）和三酰甘油（TG）含量；HE染色觀察肝組織病理學(xué)變化，油紅O染色觀察肝組織脂滴變化；免疫印跡法檢測脂質(zhì)合成關(guān)鍵酶脂肪酸合成酶（FAS）與分解關(guān)鍵酶脂蛋白脂酶（LPL）變化。結(jié)果與對照組相比，鎘染毒小鼠體質(zhì)量顯著下降（P
小鼠脊髓損傷打擊模型精細(xì)行為的比較研究2021/11/10
目的探討脊髓損傷小鼠除運(yùn)動功能障礙外，在自主運(yùn)動、探索行為和自我照顧行為等家籠（homecage）內(nèi)精細(xì)行為方面的異常表現(xiàn)。方法8周齡雌性C57BL/6小鼠10只，接受T10脊髓打擊造模。另選11只小鼠為假手術(shù)組。術(shù)后1～5周，每日固定時間將小鼠置于家籠中記錄其精細(xì)行為，使用HomeCageScan軟件分析動物32種日常行為所占時間百分比。結(jié)果與假手術(shù)組動物相比，早期脊髓損傷小鼠的探索行為、自主運(yùn)動和自我照顧行為中多數(shù)行為活動均存在顯著異常（P＜0.01），部分行為在損傷后1～5周出現(xiàn)恢復(fù)。脊髓
哮喘模型的幾種造模方法2021/01/15
1.小鼠過敏性哮喘模型BALB/c小鼠于第0天和第14天分別腹腔注射0.1mL/只OVA液(0.2mg/mL)和DBP溶液（0.5mg/kg），第21~23天連續(xù)3天以0.5%的OVA溶液霧化激發(fā)，每天于上午下午固定時間霧化2次，每次20min。霧化過程中觀察小鼠一般行為變化，后一次霧化結(jié)束后24小時，小鼠摘眼球取血，取支氣管肺泡灌洗液(BronchialAlveolarLavage,BALF)及肺組織。2.枸櫞酸誘發(fā)豚鼠咳嗽實驗取體重200-260g豚鼠，雌雄各半，置于500mL的觀察室內(nèi)，以
類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎模型幾種方法2021/01/15
（一）佐劑誘導(dǎo)型（AA）AA早由Freund于20世紀(jì)50年代創(chuàng)立，又稱弗氏佐劑關(guān)節(jié)炎，介導(dǎo)溶劑分為*佐劑（CFA）和不*佐劑（IFA）。通常用CFA作介導(dǎo)劑，AA模型在T細(xì)胞相關(guān)致炎通路的藥物篩選上發(fā)揮著重要的作用。（二）膠原誘導(dǎo)型（CIA）CIA模型是由Trentham等于1977年*建立的實驗性關(guān)節(jié)炎動物模型。通過皮下注射Ⅱ型膠原和等量CFA的混合液來建造，來源于雞、小牛和大鼠的Ⅱ型膠原均能引起關(guān)節(jié)炎癥。CIA是MHC相關(guān)型，以T/B淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎癥侵蝕為主要特征。（三）膠原抗體誘導(dǎo)
科研項目的設(shè)計方法2021/01/07
除了一些安全性評價動物實驗外，我們這里提到的大多數(shù)動物實驗都是整體科學(xué)研究計劃的一個重要組成部分，動物實驗往往是為了證明或演繹某一科研假說而采取的手段。要進(jìn)行動物實驗的設(shè)計，我們有對一般科學(xué)實驗的整體設(shè)計進(jìn)行簡單的論述。廣義來講，科學(xué)研究選題是由社會發(fā)展和人們生活水平?jīng)Q定的(如癌癥和心血管疾病的發(fā)生就和人們所處生活環(huán)境有很大的關(guān)系)；狹義來講，科學(xué)研究的選題是由研究機(jī)構(gòu)目標(biāo)和能力來決定，或由研究者興趣來決定。(一)科研假說的形成科研假說(hypothesis)是科研活動的靈魂，一個立論充分的假說
Western blot內(nèi)參蛋白的選用！2021/01/07
一、WesternBlot實驗為什么要用內(nèi)參?WesternBlot實驗結(jié)果進(jìn)行內(nèi)參校正已成為一種慣例。目的蛋白表達(dá)量的相對多少，前提條件是等量的組織細(xì)胞蛋白上樣，才有比較的基礎(chǔ)，特別是表達(dá)量不高時，上樣量的的差別就很有可能影響結(jié)果的分析。因此，在WesternBlot試驗中，進(jìn)行內(nèi)參的檢測，有以下兩點作用：1、校正蛋白質(zhì)定量、上樣過程中存在的誤差，實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性；2、使用內(nèi)參可以作為空白對照，檢測蛋白轉(zhuǎn)膜情況是否、整個WesternBlot顯色發(fā)光體系是否正常。二、你的內(nèi)參選對了嗎？作為內(nèi)參
ELASA檢測方法一2020/12/31
ELASA：用于檢測未知抗體的間接法1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1～10μg／ml，每孔加0.1ml，4℃過夜。2.次日洗滌3次。3.加稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)于反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.1ml，37℃孵育30-60分鐘，洗滌,后一遍用DDW洗滌。4.加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分鐘。5.終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸
PAS染色方法2020/12/31
一、服務(wù)介紹PAS染色法(PeriodicAcid-Schiffstain)在組織學(xué)上，主要用來檢測組織中的糖類。過碘酸把糖類相鄰兩個碳上的羥基氧化成醛基，再用Schiff試劑和醛基反應(yīng)使呈現(xiàn)紫紅色。隨著醫(yī)學(xué)實驗技術(shù)的發(fā)展，糖原染色應(yīng)用的范圍更加廣泛，如用以證明與鑒別細(xì)胞內(nèi)空泡狀的性質(zhì)，心肌病變及其他心血管疾病的診斷，糖原累積病診斷和研究，糖尿病的診斷和研究，用于某些腫瘤的診斷等。二、實驗原理PAS染色又稱過碘酸雪夫染色，糖原染色。PAS染色一般用來顯示糖元和其它多糖物質(zhì)。過碘酸能使細(xì)胞內(nèi)的多糖
MTT和CCK8區(qū)別2020/12/24
MTT增殖曲線，基本上就是基礎(chǔ)的功能實驗了，養(yǎng)過細(xì)胞的你應(yīng)該都會做。但是，要怎么樣才能省時省力呢？你也知道，如果用MTT的話，加入10ul的MTT后要等四個小時，在活細(xì)胞的線粒體中形成甲囋，然后在把培養(yǎng)基吸掉，再加上DMSO溶解，進(jìn)行檢測。這個方法是常用的MTT方法，但是會有三個問題，*個是有的甲囋不容易溶解。還有一個問題就是，由于要讓DMSO充分溶解甲囋，所以會要混勻，就會產(chǎn)生泡沫，影響酶標(biāo)儀讀值：第三個問題，就是在吸去培養(yǎng)基的時候，容易把甲囋也吸走，導(dǎo)致終讀值不準(zhǔn)。當(dāng)然也不是沒有辦法的，這篇
血清的保存2020/12/24
血清的保存應(yīng)該注意以下幾點：（1）生物學(xué)實驗中需要長期保存的血清儲存于-20℃-70℃低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時間切勿超過1個月。由于血清結(jié)冰時體積會增加約10%，因此，血清在凍入低溫冰箱前，預(yù)留體積空間，否則易發(fā)生污染或玻璃瓶凍裂。（2）熱滅活是指56℃，30分鐘加熱已解凍的血清。生物學(xué)實驗中加熱過程中須規(guī)則搖晃均勻。此熱處理的目的是使血清中的補(bǔ)體成分（complement）滅活。除非，一般不建議作此熱處理，因為熱處理會造成血清沉淀物顯著增多，而且還會影響血清的質(zhì)量。補(bǔ)體參與反應(yīng)有:細(xì)胞毒作
行為學(xué)-水迷宮2020/09/18
1.將水迷宮加入適當(dāng)?shù)乃?，水溫控制?5±1℃。2.實驗前把動物帶入實驗室中熟悉環(huán)境。3.設(shè)置軟件。4.一階段：（定位航行）將小鼠頭對著墻壁依次放入四個象限水迷宮進(jìn)行實驗（所有小鼠需全部做完后換下一象限）。若動物在60s內(nèi)登上平臺區(qū)域，則錄像結(jié)束。若動物在60s內(nèi)未登上平臺區(qū)域，則用木棍指引大鼠游上平臺，并停留30s。每只小鼠每天訓(xùn)練4次，訓(xùn)練天數(shù)為4天。5.每只動物實驗結(jié)束后需用干毛巾擦拭，必要時需要使用電吹風(fēng)吹干。6.二階段（空間探索）：待一象限到第四象限全部做完后，將水迷宮中的平臺撤走，將
行為學(xué)-曠場實驗2020/09/18
一、曠場實驗介紹曠場實驗是利用動物對新開闊環(huán)境的恐懼而主要在周邊區(qū)域活動，在區(qū)域活動較少，但動物的探究特性又促使其產(chǎn)生在區(qū)域活動的動機(jī)，也可觀察由此而產(chǎn)生的焦慮心理。藥物可以明顯增加自主的活動而減少探究行為，劑量的抗精神病藥物可以減少探究行為而不影響自主活動。二、曠場實驗原理該實驗（openfieldtest)又稱敞箱實驗，是評價實驗動物在新異環(huán)境中自主行為、探究行為與緊張度的一種方法。以實驗動物在新奇環(huán)境之中某些行為的發(fā)生頻率和持續(xù)時間等，反應(yīng)實驗動物在陌生環(huán)境中的自主行為與探究行為，以尿便次
慢性支氣管炎動物模型2020/08/26
基本原理慢性支氣管炎(chronicbronchitis)是指由感染或非感染因素引起的氣管、支氣管黏膜及其周圍組織的慢性非特異性炎性反應(yīng)。慢性支氣管炎的病理特點是支氣管腺體增生、黏液分泌增多。臨床常以咳嗽、咳痰或伴有喘息反復(fù)發(fā)作，每次持續(xù)3個月以上，連續(xù)2年以上的慢性過程為特點，嚴(yán)重時可并發(fā)阻塞性肺氣腫，甚至肺源性心臟病。慢性支氣管炎以老年人居多，病程初期一般癥狀比較輕微，發(fā)病季節(jié)以冬季較為多見，至春季天氣轉(zhuǎn)暖后癥狀緩解;晚期-般表現(xiàn)為炎性反應(yīng)較前加重，且癥狀不分季節(jié)、常年存在。目前，慢性支氣管
心肌梗死動物模型2020/08/26
造模機(jī)制通過結(jié)扎引起模型動物的冠狀動脈狹窄或閉塞，使該冠脈所供應(yīng)的心肌缺血、壞死，從而引起模型動物心肌梗死。造模方法簡要的來說，-般冠狀動脈結(jié)扎術(shù)主要分為三步:首先，動物在麻醉后，在第四肋間行左胸開胸術(shù);然后小心地將心包膜打開，在左心耳尖遠(yuǎn)端結(jié)扎左冠狀動脈前降支(leftanteriordescending,LAD),如果結(jié)扎成功的話。心電圖(electrocardiogram,ECG測顯示典型的ST段抬高，而觀察左心室前壁也會變白;后關(guān)閉胸腔。如需制作心肌缺血再灌注損傷模型，可在結(jié)扎LAD后3
糖尿病模型2020/08/20
一、服務(wù)簡介動物:大小鼠，SPF級，健康，雄性造模方法:Streptozocin鏈脲佐菌素誘發(fā)糖尿病動物模型1，I型糖尿病模型造模前普通飼料喂養(yǎng);II型糖尿病模型造模前高脂高糖飼料(含10%蔗糖，10%豬油，5%膽固醇)喂養(yǎng)1-2個月，誘發(fā)出胰島素抵抗2，STZ注射前禁食12小時以上，尾靜脈或者腹腔注射STZ溶液3，I型糖尿病模型STZ注射2次，--8-次，即成;II型糖尿病模型STZ注射--次后，高脂高糖詞料喂養(yǎng)12周二、技術(shù)流程1、制作動物模型2、根據(jù)客戶要求觀察記錄，給藥治療3、取材做后續(xù)
AD模型2020/08/20
一、服務(wù)簡介動物:大鼠，SPF級，健康，雄性造模方法:1,經(jīng)腹腔注射麻醉大鼠;剃除頭頂部毛發(fā)后固定于腦立體定位以上，手術(shù)區(qū)皮膚消毒，切開皮膚，暴露顱骨。2,參照大鼠腦立體定位圖譜(國內(nèi)多選用包新民的大鼠腦立體定向圖譜)，在前后囟2mm、中線外1mm處，用牙科鉆鑿開顱骨，切開硬腦殼膜,用雙刃刀置于上述部位的腦表面，降刀4.5mm,外移1mm,再降刀1mm，外移1.5mm,后上下抽動刀20次，以*切斷穹隆海馬傘?？尚袉蝹?cè)，也可行雙側(cè)穹隆海馬傘切除。術(shù)后連續(xù)應(yīng)用頭孢唑啉鈉(50mg/kg體重，ip)或
誘發(fā)性高血壓動物模型2020/08/12
[造模機(jī)制]腎動脈狹窄或阻塞，腎臟血液灌注的減少,刺激腎素、血管緊張索合成和分泌增多，激活腎素-血管緊張素.醛固酮系統(tǒng)(renin-angiotensin-aldosteronesystem,RAAS),引起血管收縮,增加外周阻力而升高血壓。另外,醛固酮增高或者腎臟功能的降低.引起水鈉潴留,血容量增加，使血壓升高。同時引起的氧化應(yīng)激、血流動力學(xué)改變以及炎癥反應(yīng),均可使多器官受到損害。主動脈縮窄法和腎裹法均引起交感神經(jīng)興奮和內(nèi)皮素釋放，包裹法還引起腎周炎癥，和肥胖引起的高血壓有類似機(jī)制。[造模方法
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