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人晶體上皮細(xì)胞系培養(yǎng)方法2022/07/07
人晶體上皮細(xì)胞系培養(yǎng)方法:收到人橫紋肌肉;TE671SublineNo.2說明書后,在倒置顯微鏡下觀察整個細(xì)胞生長情況:如果細(xì)胞未長滿,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi),嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶,留10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。如果細(xì)胞已長滿(達(dá)80-90%)。即可進(jìn)行傳代,具體步驟如下:a,棄去培養(yǎng)液,用PBS洗1-2次。b,向瓶內(nèi)加入1.0-2.0ml胰蛋白酶液,在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓,迅速拿回操作臺,吸取胰蛋白酶,加含有6ml含10%血清的培養(yǎng)液,輕輕吹打細(xì)
NUP155 155kDa核孔蛋白elisa基本步驟2022/07/05
NUP155155kDa核孔蛋白elisa基本步驟:1、準(zhǔn)備：從冰箱取出試劑盒，室溫復(fù)溫平衡30分鐘。2、配液：用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液成原倍的洗滌液。3、加標(biāo)準(zhǔn)品和待測樣本：取足夠數(shù)量的酶標(biāo)包被板，固定于框架上，分別設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、待測樣本孔和空白對照孔，記錄各孔位置，在標(biāo)準(zhǔn)品孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品50μL；待測樣本孔中先加入待測樣本10μL，再加樣本40μL(即樣本5倍)；空白對照孔不加。4、溫育：37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min。5、洗板：棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩
大鼠類固醇5α還原酶1酶聯(lián)免疫試劑盒樣品收集、處理及保存方法2022/06/28
大鼠類固醇5α還原酶1酶聯(lián)免疫試劑盒樣品收集、處理及保存方法1、血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液5、保存------如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70
人ADAM15 elisa試劑盒注意事項2022/06/23
人ADAM15elisa試劑盒注意事項：1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。4．請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔diyi孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后
雞神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白elisa檢測試劑盒樣本收集及儲存2022/06/21
雞神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白elisa檢測試劑盒樣本收集及儲存:1.細(xì)胞培養(yǎng)上清:將細(xì)胞培養(yǎng)基移至無菌離心管,在4℃條件下1000×g離心10min,然后將上清等量分裝于小EP管并于-20℃下保存(24小時內(nèi)檢測可放入2-8℃儲存),避免反復(fù)凍融。2.血清樣本:室溫血液自然凝固20min后,在4℃條件下1000×g離心10min,然后將上清等量分裝于小EP管并于-20℃下保存(24小時內(nèi)檢測可放入2-8℃儲存),保存過程中如有沉淀,請再次離心,避免反復(fù)凍融。3.血漿樣本:將全血收集到含抗血凝劑的管中,
鼠抗人Bcl-6單克隆抗體規(guī)律2022/06/14
鼠抗人Bcl-6單克隆抗體規(guī)律:（1）初次反應(yīng)產(chǎn)生抗體：當(dāng)抗原第一次進(jìn)入機(jī)體時，需經(jīng)一定的潛伏期才能產(chǎn)生抗體，且抗體產(chǎn)生的量也不多，在體內(nèi)維持的時間也較短。（2）再次反應(yīng)產(chǎn)生抗體：當(dāng)相同抗原第二次進(jìn)入機(jī)體后，開始時，由于原有抗體中的一部分與再次進(jìn)入的抗原結(jié)合，可使原有抗體量略為降低。隨后，抗體效價迅速大量增加，可比初次反應(yīng)產(chǎn)生的多幾倍到幾十倍，在體內(nèi)留存的時間亦較長。（3）回憶反應(yīng)產(chǎn)生抗體：由抗原刺激機(jī)體產(chǎn)生的抗體，經(jīng)過一定時間后可逐漸消失。此時若再次接觸抗原，可使已消失的抗體快速上升。如再次刺
蛋白酶抑制劑混合物(用于培養(yǎng)基)檢測程序2022/06/08
蛋白酶抑制劑混合物(用于培養(yǎng)基)檢測程序：1.加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100ul，將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次，向濾紙上印干。3.每孔中加入第一抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板：同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板：同前。7.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測吸光值。結(jié)果
土壤芳基硫酸酯酶（S-ASF）操作流程2022/05/30
土壤芳基硫酸酯酶（S-ASF）操作流程：1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；3.樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。4.除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用
小鼠雜交瘤細(xì)胞；2D6C1C2C5培養(yǎng)操作規(guī)程2022/05/26
小鼠雜交瘤細(xì)胞；2D6C1C2C5培養(yǎng)操作規(guī)程：一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：1）抗人pirin單抗雜交瘤細(xì)胞；IIIA3bC1E12D1培養(yǎng)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。2）培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。二．細(xì)胞處理：1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于
小鼠磷脂酶A2elisa檢測試劑盒注意事項2022/05/24
小鼠磷脂酶A2elisa檢測試劑盒注意事項：1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。4．請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再
植物可溶性糖含量微量法檢測試劑盒測定意義2022/05/17
植物可溶性糖含量微量法檢測試劑盒測定意義：糖類物質(zhì)是構(gòu)成植物體的重要組成成分之一，也是的主要原料和貯存物質(zhì)?？偺鞘侵笜悠分械倪€糖及在本法測定條件下能水解成還糖的蔗糖、麥芽糖和可部分水解為葡萄糖的淀粉。測定原理：蒽酮比色法?？捎糜诳扇苄詥翁?、寡糖和多糖的含量測定，具有靈敏度高﹑簡便快捷﹑適用于微量樣品的測定等優(yōu)點。需自備的儀器和用品：可見分光光度計/酶標(biāo)儀、沸水浴、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、（不允許快遞）研缽、和蒸餾水。試劑組成和配制：試劑一：液體×1瓶，4℃保存。試劑二：液體×1瓶
小鼠免疫球蛋白Melisa檢測試劑盒操作流程2022/05/12
小鼠免疫球蛋白Melisa檢測試劑盒操作流程：（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設(shè)3個平行孔；設(shè)兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個空白對照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過夜。（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。（4）陰性對照孔每孔加入PBS50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔
犬小孢子菌LAMP試劑盒實驗規(guī)則2022/05/10
犬小孢子菌LAMP試劑盒實驗規(guī)則：1、要保證移液槍的準(zhǔn)確性，誤差不能超過2%?？捎盟碗娮犹炱竭M(jìn)行確定。但有專業(yè)人員進(jìn)行矯正。2、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后，要更換槍頭。即使是吸取標(biāo)準(zhǔn)品時。3、要在實驗前1小時將試劑盒從冰箱中取出，使各種試劑都恢復(fù)到室溫，以使結(jié)果更穩(wěn)定。4、實驗時，要使底物避光保存。5、用槍吸取液體時速度不能太快，以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。6、吸取液體時，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。7、將液體加到酶標(biāo)孔中時，
小鼠色素上皮衍生因子（PEDF）ELISA免費代測試劑盒注意事項2022/04/28
小鼠色素上皮衍生因子（PEDF）ELISA免費代測試劑盒注意事項：1.實驗操作中必須使用一次性吸頭，避免交叉污染。2.加樣：加樣時，要控制加樣速度，避免*孔與后一孔間的時間間隔過大，否則將會導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時間，從而影響實驗的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性。3.孵育：嚴(yán)格按照說明書上規(guī)定的孵育時間和溫度進(jìn)行。4.反應(yīng)時間的控制：加入底物后請定時觀察反應(yīng)孔的顏色變化，如果顏色較深，請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)。5.建議實驗前預(yù)測樣品含量，如樣品濃度過高，應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋，計算結(jié)果時乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。6.建議使用本
?鄉(xiāng)土旋毛蟲探針法熒光PCR檢測試劑盒操作流程2022/04/26
鄉(xiāng)土旋毛蟲探針法熒光PCR檢測試劑盒操作流程:1.整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實驗服、儀器、耗材應(yīng)獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。2.為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機(jī)檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。3.每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充
紅螯光殼螯蝦卵黃脂磷蛋白ELISA試劑盒?操作步驟2022/04/20
紅螯光殼螯蝦卵黃脂磷蛋白ELISA試劑盒操作步驟：1.使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。2.根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。3.加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。4.甩去
小鼠雜交瘤細(xì)胞；GFP操作步驟2022/04/13
小鼠雜交瘤細(xì)胞；GFP操作步驟：1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫
倍贊氏金蠅探針法熒光定量PCR試劑盒使用方法2022/03/31
倍贊氏金蠅探針法熒光定量PCR試劑盒使用方法：一、稀釋PCR陽性對照（以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例）1.注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。2.標(biāo)記6個離心管，分別為7，6，5，4，3，2。3.用帶芯槍頭分別加入45μL熒光PCR專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。4.在7號管中加入5μL
平尾毛細(xì)線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒反應(yīng)五要素2022/03/29
平尾毛細(xì)線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒反應(yīng)五要素：參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列，就能按其設(shè)計互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則：①引物長度：15-30bp，常用為20bp左右。②引物擴(kuò)增跨度：以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。③引物堿基：G+C含量以40
洋蔥伯克氏菌探針法熒光定量PCR試劑盒實驗操作2022/03/29
洋蔥伯克氏菌探針法熒光定量PCR試劑盒實驗操作:1.模板制備（樣本制備區(qū)）建議使用配套水生動物病害基因組DNA/RNA提取試劑盒系列產(chǎn)品，具體過程詳見產(chǎn)品說明書。2．添加模板（模板添加區(qū)，放置于冰盒中進(jìn)行）請于-20℃條件下保存，有效期12個月取出所需測試數(shù)的已含有反應(yīng)液A-TSV-I的PCR管，將試劑*解凍，離心30秒，在管蓋上標(biāo)記管名（陰性對照管NG、樣品XX、陽性對照管PG）。打開管蓋向各管管底分別加入0.8μLB-I及0.2μLR-I，蓋上陰性對照管管蓋，其他各管分別沿管壁加入2μL模板
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