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青島高科技工業(yè)園海博生物有限公司
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生化反應(yīng)中的D型與L型的糖、醇、氨基酸說明2024/10/25
化學(xué)課上我們學(xué)到過,當(dāng)碳原子連接四個不同原子或基團(tuán)時,由于空間位置排列不同,會出現(xiàn)兩種互為鏡像的異構(gòu)體,就像我們的左手和右手,相同但不能互相重合,稱為對映異構(gòu)體,也叫鏡像異構(gòu)體或旋光異構(gòu)體,可通過費(fèi)舍爾投影式或旋光儀測定將兩種異構(gòu)體分別稱為D型(也叫右旋或R型)和L型(也叫左旋或S型)。在細(xì)菌的生化反應(yīng)試驗(yàn)和培養(yǎng)基的配制中,我們遇到的糖醇(如葡萄糖、甘露醇、木糖等)、氨基酸(如賴氨酸、鳥氨酸、精氨酸等)都存在D型和L型的對映異構(gòu)體。以甘露醇為例,有D-甘露醇和L-甘露醇,其中D-甘露醇是在自然界
2216E瓊脂培養(yǎng)基的原理及使用方法2024/10/25
一、試驗(yàn)原理用于海生細(xì)菌的培養(yǎng)和計(jì)數(shù)。蛋白胨、酵母粉為微生物的生長提供碳源、氮源、維生素和生長因子,滿足細(xì)菌生長的需求;各種無機(jī)鹽提供與海水相似的環(huán)境,適合海生細(xì)菌的生長;瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑。二、培養(yǎng)基配方(g/L)蛋白胨5.0酵母粉1.0檸檬酸鐵0.1氯化鈉19.45氯化鎂5.98硫酸鈉3.24氯化鈣1.8氯hua鉀0.55碳酸鈉0.16溴化鉀0.08氯化鍶0.034硼酸0.022硅酸鈉0.004氟化鈉0.0024硝suan銨0.0016磷酸氫二鈉0.008瓊脂15.0pH7.6±0.225
生化反應(yīng)中的符號說明2024/10/12
在細(xì)菌的生化反應(yīng)試驗(yàn)中,我們都知道陽性反應(yīng)用“+”表示,陰性反應(yīng)用“-”表示,但在實(shí)際生化試驗(yàn)中,即使是同一菌屬的不同菌株,同樣的反應(yīng)也會有差別,除了用“+”“-”表示陽性和陰性外,還引入了其他一些符號做為生化反應(yīng)的擴(kuò)充說明,標(biāo)準(zhǔn)或文獻(xiàn)的生化表格下方通常也會附帶有符號的說明?!?”:常規(guī)的陽性反應(yīng)表示方式,但需注意,“+”也并不代表一定是陽性反應(yīng),在細(xì)菌生化鑒定手冊中通常會有說明,“+”一般代表的是99%以上(或90%以上)的菌株為陽性反應(yīng)(即仍然有<1%的可能性遇到陰性反應(yīng)的突變菌株或稀有菌株
常見微生物培養(yǎng)基原材料的介紹—蛋白胨2024/09/29
蛋白胨是微生物培養(yǎng)基常用的原材料之一。主要供給微生物需要的氮源、氨基酸等。其主要特點(diǎn)為:1、易溶于水;2、可被微生物直接利用于生長繁殖,不受高溫高熱而凝固。3、是一種兩性電解質(zhì),具有緩沖作用。蛋白胨從來源上可分為動物性蛋白胨、植物性蛋白胨、微生物蛋白胨。胰胨肉胨骨胨等都是動物性蛋白胨;而大豆蛋白胨等是植物性蛋白胨;酵母蛋白胨屬于微生物蛋白胨。在微生物培養(yǎng)基中常用的蛋白胨有:一、肉蛋白胨1、肉蛋白胨(胃酶消化)胃酶消化動物組織所得的蛋白胨,英文名稱為PepticDigestofAnimalTiss
蛋白胨水生化管原理和使用方法2024/09/29
一、試驗(yàn)原理:用于細(xì)菌靛基質(zhì)試驗(yàn)。蛋白胨提供碳氮源、維生素和生長因子;氯化鈉維持均衡的滲透壓;含有色氨酸酶的細(xì)菌,能分解蛋白胨中的色氨酸,形成靛基質(zhì)(吲哚)。靛基質(zhì)無色,當(dāng)加入對氨基苯甲酸試劑后,形成可見的紅紫色醌式化合物,即玫瑰靛基質(zhì)。二、培養(yǎng)基配方(g/L):蛋白胨10.0氯化鈉5.0pH7.425℃三、試驗(yàn)方法:1.將標(biāo)準(zhǔn)儲備菌株接種到非選擇性肉湯中或采用其他制備方法,制成5McFarland濁度(約109CFU/ml)的菌懸液。2.吸取0.05-0.08ml(約1-2滴)至生化管內(nèi),36
大腸桿菌/大腸菌群顯色培養(yǎng)基原理及使用方法2024/09/14
一、試驗(yàn)原理:大腸桿菌/大腸菌群顯色培養(yǎng)基(第二代)是青島海博生物公司再次改良的培養(yǎng)基,用于食品、水、牛奶、冰激凌和肉制品中大腸桿菌和大腸菌群的快速檢測。大腸桿菌和大腸菌群分別具有特異性的酶,利用其分解底物得到產(chǎn)物的不同來區(qū)分大腸桿菌和大腸菌群。大腸桿菌顯藍(lán)色至紫色,大腸菌群顯紅色,革蘭氏陽性菌被抑制。二、培養(yǎng)基配方(g/L):特殊營養(yǎng)物質(zhì)33.0顯色劑0.3瓊脂13.0pH6.8-7.225℃三、試驗(yàn)方法:1.稱取本品46.3g加入1000ml蒸餾水,加熱溶解并不停攪拌,煮沸不要超過1分鐘。取
SOC培養(yǎng)基的實(shí)驗(yàn)原理和質(zhì)控方法2024/09/14
一、用途用于基因工程菌大腸桿菌培養(yǎng)。二、培養(yǎng)基配方(g/L)胰蛋白胨20.0酵母浸粉5.0氯化鈉0.5氯hua鉀0.186氯化鎂0.95硫酸鎂1.2葡萄糖3.6pH值7.0±0.225℃三、原理胰蛋白胨和酵母浸粉提供基本營養(yǎng),氯hua鉀、氯化鈉和氯化鎂可維持滲透壓并提供細(xì)菌生長所需的基本元素,促進(jìn)有關(guān)酶的合成,葡萄糖提供碳源。四、試驗(yàn)方法1、稱取本品31.4克,加熱溶解于1000ml蒸餾水,分裝于試管中,每管9ml,116℃高壓滅菌30分鐘,備用。2、將標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)控菌株稀釋至合適梯度,制備成含菌量1
GBT5750.12-2006 生活飲用水中耐熱大腸菌群檢驗(yàn)方法及結(jié)果分析2024/08/30
一、耐熱大腸菌群情況簡要介紹耐熱大腸菌群的定義:用提高培養(yǎng)溫度的方法將自然環(huán)境中的大腸菌群與糞便中的大腸菌群區(qū)分開,在44.5℃仍能生長的大腸菌群,稱為耐熱大腸菌群。通常情況下,耐熱大腸菌群與大腸菌群相比,在人和動物糞便中所占的比例較大,而且由于在自然界容易死亡等原因,耐熱大腸菌群的存在可認(rèn)為食品直接或間接的受到了比較近期的糞便污染。因而,耐熱大腸菌群在食品中的檢出,與大腸菌群相比,說明食品受到了更為不清潔的加工,腸道致病菌和食物中毒菌的可能性更大。二、參考標(biāo)準(zhǔn)《GBT5750.12-2006生
MH肉湯的試驗(yàn)方法與現(xiàn)象2024/08/22
一、試驗(yàn)用途用于抗生素敏感實(shí)驗(yàn)。二、試驗(yàn)原理牛肉粉和酸水解酪蛋白提供氮源、維生素和氨基酸;可溶性淀粉吸收有毒的代謝產(chǎn)物。三、培養(yǎng)基配方(g/L)牛肉粉2.0酸水解酪蛋白17.5可溶性淀粉1.5pH值7.4±0.225℃四、試驗(yàn)方法1、稱取本品21.0g,加熱溶解于1000ml蒸餾水中,分裝試管,121℃高壓滅菌15分鐘,備用。2、將質(zhì)控菌株稀釋至合適梯度后,吸取100微升菌懸液加入至試管內(nèi)。3、將接種菌液的MH肉湯放置于36±1℃培養(yǎng)18-24小時,記錄試驗(yàn)結(jié)果。五、試驗(yàn)結(jié)果接種以下質(zhì)控菌株,3
淀粉水解(枯草芽孢桿菌)原理和使用方法2024/08/22
一、試驗(yàn)原理:用于枯草芽孢桿菌的淀粉水解試驗(yàn)。牛肉浸粉、蛋白胨提供氮源、維生素和生長因子;氯化鈉維持均衡的滲透壓;可溶性淀粉提供碳源。二、培養(yǎng)基配方(g/L):蛋白胨10.0牛肉浸粉3.0氯化鈉5.0可溶性淀粉30.0pH7.025℃三、試驗(yàn)方法:1.將標(biāo)準(zhǔn)儲備菌株接種到非選擇性肉湯中或采用其他制備方法,制成5McFarland濁度(約109CFU/ml)的菌懸液。2.吸取0.05-0.08ml(約1-2滴)至生化管內(nèi),36±1℃培養(yǎng)2d-5d后,觀察結(jié)果,再滴加碘液,觀察實(shí)驗(yàn)結(jié)果。四、結(jié)果觀察
營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基的介紹2024/08/22
一、試驗(yàn)原理:用于一般細(xì)菌培養(yǎng)、轉(zhuǎn)種、復(fù)壯、增菌等(GB標(biāo)準(zhǔn))。蛋白胨和牛肉浸粉提供碳氮源、維生素和生長因子等生長必需的營養(yǎng)物質(zhì);氯化鈉用于維持培養(yǎng)基的滲透壓。二、培養(yǎng)基配方(g/L):蛋白胨10.0牛肉浸粉3.0氯化鈉5.0pH7.2±0.225℃三、試驗(yàn)方法:1.稱取本品18.0g,加熱攪拌溶解于1000ml蒸餾水中,分裝三角瓶或試管,121℃高壓滅菌15鐘,備用。2.制備好的液態(tài)培養(yǎng)基保存于2-8℃,應(yīng)避免光線直接照射。干燥培養(yǎng)基應(yīng)放置于陰暗干燥處,室溫保存。3.制備質(zhì)控菌液。4.把質(zhì)控菌
酵母菌的糖發(fā)酵試驗(yàn)-杜氏管發(fā)酵法2024/08/22
一、原理介紹酵母菌屬真核生物,與細(xì)菌相比,酵母菌具有更完整的呼吸系統(tǒng),可將糖類(包括糖、醇、苷、甙等)全部氧化分解為二氧化碳和水,而細(xì)菌通常只能將糖類分解為低分子的有機(jī)酸等產(chǎn)物。因此,細(xì)菌的糖發(fā)酵試驗(yàn)常用酸堿指示劑通過顏色的變化檢測某種糖是否能夠被細(xì)菌分解利用,而酵母菌則可以通過杜氏管觀察是否產(chǎn)氣,來判斷酵母菌是否能分解利用某種糖。二、培養(yǎng)基的配制及接種(1)基礎(chǔ)培養(yǎng)基(0.5%酵母液):稱取0.5g酵母浸粉,加熱溶解于100mL純化水中,分裝至含導(dǎo)管的試管中,每支7.2mL(分裝量依試管尺寸而
專性厭氧菌的培養(yǎng)方法及注意事項(xiàng)2024/07/31
一、專性厭氧菌的介紹根據(jù)細(xì)菌生長對氧的需求,主要可分為四大類:專性需氧菌、兼性厭氧菌、專性厭氧菌、微需氧菌。專性厭氧菌需要在嚴(yán)格無氧的氣體環(huán)境中生長,氧氣會對菌產(chǎn)生毒害作用,也有一些厭氧菌在含5%-10%二氧化碳?xì)怏w環(huán)境中可耐受低濃度的氧氣。常見的專性厭氧菌有梭菌屬(如產(chǎn)氣莢膜梭菌、肉毒梭菌、破傷風(fēng)梭菌、艱難梭菌等)、雙歧桿菌屬(如嬰兒雙歧桿菌、動物雙歧桿菌等)、擬桿菌屬、梭桿菌屬、厭氧消化鏈球菌屬等。二、厭氧培養(yǎng)環(huán)境的構(gòu)造(1)使用厭氧培養(yǎng)箱,通氣培養(yǎng)。一些厭氧培養(yǎng)箱可同時進(jìn)行接種等微生物操作
甘露醇卵黃培養(yǎng)基基礎(chǔ)原理和使用方法2024/07/19
一、試驗(yàn)原理:用于分離培養(yǎng)病原性金黃SE葡萄球菌。蛋白胨和牛肉粉提供氮源、維生素和生長因子;D—甘露醇為可發(fā)酵糖類;7.5%濃度氯化鈉可抑制除葡萄球菌外的大部分微生物的生長;瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑;酚紅為pH指示劑,金黃SE葡萄球菌可分解培養(yǎng)基中的甘露醇產(chǎn)酸,使菌落周圍變黃,并能降解卵黃中的卵磷脂使菌落產(chǎn)生暈圈。二、培養(yǎng)基配方(g/L):蛋白胨10.0D-甘露醇10.0牛肉粉2.5氯化鈉75.0酚紅0.025瓊脂15.0pH7.4±0.225℃三、試驗(yàn)方法:粉體裝培養(yǎng)基的使用:1.稱取本品112.
M-肉湯培養(yǎng)基的原理及使用方法2024/07/11
一、試驗(yàn)原理:用于食品中沙門氏菌酶標(biāo)免疫試驗(yàn)的后增菌培養(yǎng)。胰酪蛋白胨、酵母浸粉提供碳源和氮源;D-甘露糖提供能源;磷酸氫二鉀為緩沖劑;氯HUA錳、硫酸鎂和硫酸亞鐵提供必需的微量元素;氯化鈉維持均衡的滲透壓;吐溫80是非離子表面活性劑。二、培養(yǎng)基配方(g/L):胰酪蛋白胨12.5酵母浸粉5.0D-甘露糖2.0檸檬酸鈉5.0氯化鎂0.14氯化鈉5.0磷酸氫二鉀5.0硫酸鎂0.8硫酸亞鐵0.04吐溫800.75pH7.0±0.225℃三、試驗(yàn)方法:1、稱取本品36.2g,加熱溶解于1000ml蒸餾水中
梭菌鑒定培養(yǎng)基(DCA)原理及現(xiàn)象2024/07/05
一、用途及原理用于干燥食品中亞硫酸鹽還原梭菌的計(jì)數(shù)。蛋白胨、牛肉浸粉、酵母浸粉可為細(xì)菌的生長提供豐富的營養(yǎng),葡萄糖、淀粉可做為碳源供細(xì)菌利用,同時淀粉有助于芽孢的萌發(fā)生長,L-半胱氨酸鹽酸鹽為還原劑,幫助維持厭氧環(huán)境,有利于厭氧菌的生長;刃天青為氧氣指示劑,有氧時變?yōu)榧t色,可幫助監(jiān)測培養(yǎng)基是否處于無氧環(huán)境;檸檬酸鐵銨和亞硫酸鈉可檢測硫化氫的產(chǎn)生,能還原亞硫酸鹽的梭菌可將亞硫酸鹽還原為硫化氫,硫化氫與鐵離子結(jié)合,使菌落呈現(xiàn)黑色。二、培養(yǎng)基配方(g/L)胰酪蛋白胨5.0蛋白胨5.0牛肉浸粉8.0可溶
乳酸菌檢驗(yàn)的計(jì)數(shù)方法與規(guī)則詳解2024/06/27
一、引言前期曾介紹了乳酸菌的分類和乳酸菌檢驗(yàn)所用的幾種主要培養(yǎng)基,本文將進(jìn)一步就GB4789.35中乳酸菌檢驗(yàn)時所用的計(jì)數(shù)方法和規(guī)則進(jìn)行詳細(xì)解讀。二、計(jì)數(shù)方法《GB4789.35食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗(yàn)乳酸菌檢驗(yàn)》中,主要涉及了3種乳酸菌,分別為乳桿菌屬、雙歧桿菌屬和嗜熱鏈球菌屬。由于3種乳酸菌的培養(yǎng)條件和特征各有不同,要檢驗(yàn)出樣品中乳酸菌的總數(shù),就需要根據(jù)菌種的不同選擇使用合適的培養(yǎng)基,對結(jié)果進(jìn)行計(jì)數(shù)。標(biāo)準(zhǔn)中是這樣規(guī)定的:(表1)其中:6.2.3.2是使用改良MRS培養(yǎng)基傾注,厭氧培養(yǎng)
乳酸桿菌選擇性培養(yǎng)基原理及實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象2024/06/20
一、用途:用于乳酸菌的分離培養(yǎng)。二、實(shí)驗(yàn)原理:胰酪蛋白胨、牛酵母浸粉提供氮源、維生素、生長因子;葡萄糖提供碳源;磷酸氫二鉀為緩沖劑;枸櫞酸三銨、硫酸鎂、硫酸錳、硫酸亞鐵、吐溫-80和乙酸鈉為培養(yǎng)各種乳酸菌提供生長因子,吐溫80為乳酸桿菌提供所需的代謝脂肪酸;檸檬酸銨和乙酸鈉能夠抑制一些雜菌的生長,包括鏈球菌、霉菌和除乳酸桿菌外的大多數(shù)口腔微生物菌群;加入乙酸,使pH值降低,抑制了其它細(xì)菌的生長,有利于乳酸桿菌的分離;加入碳酸鈣是由于乳酸菌在培養(yǎng)基中產(chǎn)酸可以形成溶鈣環(huán),便于區(qū)分;瓊脂是培養(yǎng)基的凝固
SS瓊脂(沙門菌、志賀氏菌瓊脂)原理及用途2024/06/14
一、用途及原理該培養(yǎng)基主要用于沙門氏菌的分離培養(yǎng),也可用于志賀氏菌、小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌等腸道致病菌的分離培養(yǎng)。月示胨、牛肉粉提供碳源、氮源、維生素和礦物質(zhì);乳糖為可發(fā)酵的糖類;三號膽鹽、枸櫞酸鈉和煌綠抑制革蘭氏陽性菌及大多數(shù)的大腸菌群和變形桿菌,但不影響沙門氏菌的生長;硫代硫酸鈉和枸櫞酸鐵用于檢測硫化氫的產(chǎn)生,使菌落中心呈黑色;中性紅為pH指示劑,發(fā)酵糖產(chǎn)酸的菌落呈紅色,不發(fā)酵糖的菌落為無色;瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑。多數(shù)沙門氏菌不發(fā)酵乳糖,并產(chǎn)硫化氫,在SS平板上菌落為無色透明并有黑色中心,不產(chǎn)
布氏肉湯培養(yǎng)基的使用原理及方法2024/06/06
一、實(shí)驗(yàn)原理:蛋白胨、酵母浸粉、胰酪蛋白胨提供氮源、維生素和生長因子;葡萄糖提供碳源;氯化鈉維持均衡的滲透壓;亞硫酸氫鈉為還原劑。二、實(shí)驗(yàn)方法:稱取本品28.1g,加熱攪拌溶解于1000ml蒸餾水中,分裝試管,121℃高壓滅菌15分鐘,備用。1、制備質(zhì)控菌液。2、把質(zhì)控菌液加入試管中。3、在42℃微需氧培養(yǎng)48小時,記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果。三、結(jié)果判定:接種以下質(zhì)控菌株,放置42±1℃微需氧培養(yǎng)48±2小時。質(zhì)控菌株菌株編號接種量(CFU)生長情況其他特征空腸彎曲菌ATCC3329110-100+++渾濁
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