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上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司
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斑馬魚丙二醛(MDA)ELISA 實(shí)驗(yàn)說明2024/12/12
檢測范圍0.1nmol/ml-6nmol/ml使用目的本試劑盒用于測定斑馬魚血清、血漿及相關(guān)液體樣本中丙二醛(MDA)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中斑馬魚丙二醛(MDA)水平。用純化的斑馬魚丙二醛(MDA)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入丙二醛(MDA),再與HRP標(biāo)記的丙二醛(MDA)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹-底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的丙二醛
人糖鏈抗原153(CA153)ELISA 實(shí)驗(yàn)說明2024/12/06
檢測范圍0.5U/ml-18U/ml使用目的本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中糖鏈抗原153(CA153)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人糖鏈抗原153(CA153)水平。用純化的人糖鏈抗原153(CA153)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入糖鏈抗原153(CA153),再與HRP標(biāo)記的糖鏈抗原153(CA153)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹-底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成
影響酶活性的條件及酶在ELISA檢測中的步驟2024/11/29
1.溫度溫度是影響酶活性的關(guān)鍵因素之一。在一定范圍內(nèi),隨著溫度升高,酶活性增強(qiáng),到達(dá)最適溫度時(shí),酶活性最-強(qiáng)。超過最適溫度,酶活性會迅速降低,因?yàn)楦邷貢?dǎo)致酶分子變性,從而失去催化活性。相反,低溫會減緩酶促反應(yīng)速率,但酶分子本身并未變性,溫度恢復(fù)后酶活性可逐漸恢復(fù)。2.pH值pH值對酶活性同樣具有顯著影響。每種酶都有其最佳pH范圍,在此范圍內(nèi)酶活性最-強(qiáng)。pH值的變化可能通過改變酶的電荷狀態(tài)來影響其三維結(jié)構(gòu),從而導(dǎo)致酶活性降低甚至失活。因此,在進(jìn)行酶促反應(yīng)時(shí),需要精確調(diào)節(jié)反應(yīng)體系的pH值,以確保
AAV的定義、方法及應(yīng)用2024/10/29
一、AAV的定義AAV是一種單鏈DNA缺陷型病毒,屬于微小病毒科。其基因組DNA小于5kb,無包膜,外形為裸露的二十面體顆粒。AAV不能獨(dú)立復(fù)制,只有在輔助病毒(如腺病毒、單純皰疹病毒等)存在時(shí),才能進(jìn)行復(fù)制和溶細(xì)胞性感染。AAV的基因組兩端為末端反向重復(fù)序列(ITR),中間基因組編碼兩個(gè)主要蛋白:Cap(衣殼蛋白)和Rep(復(fù)制白)。ITR對于病毒的復(fù)制和包裝具有決定性作用。二、AAV的生產(chǎn)方法AAV的生產(chǎn)工藝通常涉及多個(gè)步驟,包括質(zhì)粒構(gòu)建、細(xì)胞培養(yǎng)、病毒包裝、收集和純化等。以下是AAV生產(chǎn)的
蛋白質(zhì)純化的相關(guān)介紹2024/10/23
一、蛋白質(zhì)純化的定義蛋白質(zhì)純化是指利用蛋白質(zhì)之間的相似性和差異性,通過一系列物理化學(xué)手段,從復(fù)雜的生物樣品中分離出目標(biāo)蛋白質(zhì)的過程。這一過程要求去除大部分雜質(zhì),同時(shí)保持蛋白質(zhì)的天然活性和結(jié)構(gòu)完整性。二、蛋白質(zhì)純化的方法蛋白質(zhì)純化方法多種多樣,通常根據(jù)蛋白質(zhì)的物理化學(xué)性質(zhì)(如分子量、電荷、疏水性和特異性結(jié)合能力等)來選擇合適的方法。以下是一些常用的蛋白質(zhì)純化方法:?鹽析法?:通過在蛋白質(zhì)溶液中加入高濃度的鹽(如硫酸銨),使蛋白質(zhì)因溶解度降低而沉淀析出。這種方法簡單有效,但需注意鹽濃度和pH值的控制
人E3泛素連接酶(DTX3L) ELISA實(shí)驗(yàn)說明2024/10/14
檢測范圍:4pg/ml-220pg/ml使用目的:本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中E3泛素連接酶(DTX3L)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人E3泛素連接酶(DTX3L)水平。用純化的人E3泛素連接酶(DTX3L)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入E3泛素連接酶(DTX3L),再與HRP標(biāo)記的E3泛素連接酶(DTX3L)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過充分洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)
常見的支原體檢測方法2024/10/10
支原體是一類無細(xì)胞壁、高度多形性的最小原核細(xì)胞型微生物,其大小通常在0.1-0.3微米之間。由于它們能形成絲狀與分支形狀,因此得名支原體。支原體廣泛存在于人和動物體內(nèi),大多數(shù)種類并不致病,但在特定條件下,如機(jī)體免疫力下降時(shí),部分支原體種類可能引發(fā)疾病。對人致病的支原體主要包括肺炎支原體、解脲支原體、人型支原體和生殖器支原體等,它們分別能引起呼吸道和泌尿生殖道的感染。常見的支原體檢測方法1.核酸檢測法核酸檢測法是目前支原體檢測中最敏感、最準(zhǔn)確的方法之一。該方法利用PCR(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))技術(shù)擴(kuò)增支
流式細(xì)胞術(shù)在生物實(shí)驗(yàn)中的應(yīng)用2024/09/25
流式細(xì)胞術(shù)(FlowCytometry,F(xiàn)CM)作為一種先進(jìn)的細(xì)胞分析技術(shù),自其誕生以來,便在生物醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域發(fā)揮著不可替代的作用。該技術(shù)通過高速、多參數(shù)地分析單個(gè)細(xì)胞或微粒的熒光信號和散射光信號,為研究者提供了詳盡的細(xì)胞生物學(xué)信息,今天恒遠(yuǎn)生物帶你認(rèn)識細(xì)胞術(shù)在生物實(shí)驗(yàn)中的具體應(yīng)用。一、流式細(xì)胞術(shù)的基本原理流式細(xì)胞術(shù)的核心在于流式細(xì)胞儀的使用。該儀器利用鞘液包繞的樣品流通過激光束,激發(fā)細(xì)胞或微粒上的熒光染料,產(chǎn)生熒光信號和散射光信號。這些信號被光電倍增管接收并轉(zhuǎn)換為電信號,隨后通過計(jì)算機(jī)系統(tǒng)進(jìn)行
?微生物內(nèi)毒素檢測方法及注意事項(xiàng)2024/09/19
微生物內(nèi)毒素,主要存在于革蘭氏陰性細(xì)菌的細(xì)胞壁中,是一種由脂多糖(LPS)構(gòu)成的毒性成分。當(dāng)細(xì)菌死亡裂解后,內(nèi)毒素被釋放到環(huán)境中,可對人體健康產(chǎn)生嚴(yán)重影響,如引起發(fā)熱、微循環(huán)障礙、內(nèi)毒素血癥甚至休克等。因此,對微生物內(nèi)毒素的準(zhǔn)確檢測在醫(yī)藥、食品、生物制品等領(lǐng)域至關(guān)重要。恒遠(yuǎn)生物為你介紹?微生物內(nèi)毒素檢測方法及注意事項(xiàng)。一、微生物內(nèi)毒素檢測方法1.鱟試驗(yàn)法(LAL試驗(yàn))鱟試驗(yàn)法是經(jīng)典的內(nèi)毒素檢測方法之一,利用鱟血細(xì)胞(變形細(xì)胞)對內(nèi)毒素的高度敏感性進(jìn)行檢測。通過將待測樣品與鱟試劑混合,觀察鱟血細(xì)胞
?ELISA試劑盒在海藻糖檢測的應(yīng)用2024/09/10
近年來,隨著檢測技術(shù)的發(fā)展,酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)因其高靈敏度和特異性,在海藻糖檢測中得到了廣泛應(yīng)用。今天恒遠(yuǎn)生物為你介紹ELISA試劑盒在海藻糖檢測中的應(yīng)用。在海藻糖檢測中,ELISA試劑盒通常采用雙抗體夾心法。具體步驟如下:??準(zhǔn)備工作?:將ELISA試劑盒從冷藏環(huán)境中取出,在室溫下平衡20-30分鐘。準(zhǔn)備所需的試劑和器材,如酶標(biāo)儀、高精度加樣器、洗板機(jī)等。?標(biāo)準(zhǔn)品稀釋?:按照說明書要求,將原倍標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行梯度稀釋,以制備不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。?加樣?:在酶標(biāo)包被板上設(shè)置空白孔、標(biāo)準(zhǔn)品
海藻糖在生物制品中的應(yīng)用及檢測方法2024/09/04
海藻糖又稱為漏蘆糖、蕈糖,是由兩個(gè)葡萄糖分子組成的一個(gè)非還原性雙糖,分子式為C12H22O11。海藻糖結(jié)構(gòu)式為α-D-吡喃葡糖基~α-D-吡喃葡糖苷,經(jīng)常以二水化合物存在,分子式為C12H22O11·2H2O。海藻糖結(jié)構(gòu)式海藻糖是一種典型應(yīng)激代謝物,能夠在高溫、高寒、高滲透壓及干燥失水等惡劣環(huán)境條件下在細(xì)胞表面形成特殊的保護(hù)膜,有效地保護(hù)生物分子結(jié)構(gòu)不被破壞,從而維持生命體的生命過程和生物特征。海藻糖在生物制品中的應(yīng)用1.凍干保護(hù)劑在生物制品的凍干過程中,海藻糖作為保護(hù)劑被廣泛應(yīng)用。凍干保護(hù)機(jī)制
ELISA常見問題與解決方法2024/08/30
ELISA(酶聯(lián)免疫吸附劑測定)是一種常用的生物化學(xué)技術(shù),用于檢測樣品中的特定抗原或抗體。然而,在實(shí)際操作過程中,科研人員常常會遇到一些問題,影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性,以下是一些可能出現(xiàn)的問題及其解決方法:一、陰性對照出現(xiàn)陽性結(jié)果:可能原因:試劑污染、操作不當(dāng)、洗板不透徹。解決方法:更換新試劑,小心操作避免污染,確保洗板透徹。二、酶標(biāo)板整體背景高:可能原因:抗體非特異性結(jié)合、底物溶液污染、孵育過程未避光。解決方法:使用封閉液封閉非特異性結(jié)合位點(diǎn),適當(dāng)稀釋底物溶液,確保孵育過程避光。三、復(fù)孔之
人豬囊尾蚴抗體IgG(CYT IgG)酶聯(lián)免疫分析2024/08/22
人豬囊尾蚴抗體IgG(CYTIgG)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。96T使用目的:本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中囊尾蚴抗體IgG(CYTIgG)表達(dá)。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗原夾心法測定標(biāo)本中豬囊尾蚴抗體IgG(CYTIgG)表達(dá)。用純化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,可與樣品中豬囊尾蚴抗體IgG(CYTIgG)相結(jié)合,經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗體和其他成分后再與HRP標(biāo)記的抗原結(jié)合,形成抗原-抗體-抗原復(fù)合物,經(jīng)過che底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催
噬菌體試驗(yàn)的基本方法2024/08/12
(一)噬菌體的分離和純化1.噬菌體的分離每份未處理的污水樣品取100mL,混合后,經(jīng)36±1℃培養(yǎng)14~24h,通過孔徑為0.45mm的薄膜濾器,檢查濾液中是否有噬菌體的存在。用斑點(diǎn)試驗(yàn)法檢查噬菌體。2.單斑純化根據(jù)斑點(diǎn)試驗(yàn)法的結(jié)果,估計(jì)濾液內(nèi)噬菌體的數(shù)量。將濾液按百倍稀釋法作兩次連續(xù)稀釋。即吸取0.02mL,稀釋在2mL肉湯內(nèi),使成10-2;再吸取此稀釋液0.02mL,稀釋在2mL肉湯內(nèi),使成10-4。(二)PFU和RTDPFU和RTD是噬菌體效價(jià)的計(jì)量單位。PFU是噬斑形成單位,表示有感染能
植物羥基肉桂酰基轉(zhuǎn)移酶(HCT)ELISA實(shí)驗(yàn)說明2024/08/05
檢測范圍:5U/L-180U/L使用目的:本試劑盒用于測定植物組織,細(xì)胞及其它相關(guān)樣本中羥基肉桂酰基轉(zhuǎn)移酶(HCT)活性。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中植物羥基肉桂酰基轉(zhuǎn)移酶(HCT)水平。用純化的植物羥基肉桂酰基轉(zhuǎn)移酶(HCT)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入植物羥基肉桂?;D(zhuǎn)移酶(HCT),再與HRP標(biāo)記的羥基肉桂?;D(zhuǎn)移酶(HCT)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹che底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的
恒遠(yuǎn)生物|影響培養(yǎng)基滅菌效果的因素2024/07/30
培養(yǎng)基滅菌是否徹-底,影響因素有很多,除了培養(yǎng)基內(nèi)雜菌的種類和數(shù)量,滅菌溫度的高低,時(shí)間長短外,還有以下因素:1.營養(yǎng)成分的保持濕熱滅菌時(shí),微生物被殺死的同時(shí),培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分也遭到了一定的破壞,特別是氨基酸和維生素。如在121℃,僅20min,就有59%的賴氨酸和精氨酸及其他堿性氨基酸被破壞,蛋氨酸和色氨酸也有相當(dāng)數(shù)量被破壞。在熱的作用下某些營養(yǎng)成分還可能因受熱而相互之間發(fā)生反應(yīng),造成培養(yǎng)基中原有營養(yǎng)成分的數(shù)量變化,因而影響培養(yǎng)基質(zhì)量。2.微生物的耐熱性細(xì)菌芽孢的熱阻較大,滅菌所需要的時(shí)間取決
牛乳鐵蛋白(LTF)ELISA實(shí)驗(yàn)說明2024/07/26
檢測范圍:2ng/ml-100ng/ml使用目的:本試劑盒用于測定牛血清、血漿及相關(guān)液體樣本中乳鐵蛋白(LTF)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中牛乳鐵蛋白(LTF)水平。用純化的牛乳鐵蛋白(LTF)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入乳鐵蛋白(LTF),再與HRP標(biāo)記的乳鐵蛋白(LTF)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹-底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的乳鐵蛋白(L
常見細(xì)菌染色方法2024/07/17
常見的染色方法包括簡單染色、負(fù)染色、革蘭氏染色、芽孢染色法、鞭毛染色、莢膜染色。制備細(xì)菌染色片一般要經(jīng)過涂片、固定、染色、水洗、干燥等步驟,然后用顯微鏡甚至油鏡觀察。1.簡單染色:不同細(xì)菌或由于觀察者所側(cè)重觀察的內(nèi)容不同,所使用的染料也有差異,但簡單染色的方法是一樣的。先按照上述的制片方法制片,制成需要觀察的玻片后,使用相對應(yīng)的染料滴加到玻片上的菌膜區(qū)域,以覆蓋菌膜為準(zhǔn)。按照不同染料的要求,結(jié)合所觀察的內(nèi)容確定染色時(shí)間,染色時(shí)間到達(dá)時(shí)進(jìn)行水洗,干燥等步驟。最后得到的玻片加蓋蓋玻片即可進(jìn)行鏡檢。如
大鼠降鈣素原(PCT)ELISA實(shí)驗(yàn)說明2024/07/12
檢測范圍:10ng/L-450ng/L使用目的:本試劑盒用于測定大鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中降鈣素原(PCT)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中大鼠降鈣素原(PCT)水平。用純化的大鼠降鈣素原(PCT)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入降鈣素原(PCT),再與HRP標(biāo)記的降鈣素原(PCT)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹-底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的降鈣素原
?凍融血清沉淀物是否會影響血清品質(zhì)2024/07/04
做細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)經(jīng)常會用到血清,血清用不完我們會凍起來下次使用。但相信大家也會發(fā)現(xiàn)在融化血清過程中會出現(xiàn)白色的沉淀物質(zhì),就會疑惑這種情況是否是血清出現(xiàn)問題。首先呢我們要搞清楚血清中絮狀沉淀物是什么,沉淀物包含纖維蛋白和脂蛋白,這是正常特性,不會影響產(chǎn)品性質(zhì)。要除去沉淀,離心血清(400g,1~2分鐘)或簡單的讓其沉淀在瓶子底部,將血清小心的轉(zhuǎn)移到另一個(gè)無菌瓶里(一般不建議采用過濾的方法除去沉淀,因?yàn)槌恋頃氯麨V膜而無法過濾)。大多情況輕輕搖動沉淀并加熱至37℃就會再溶解。所以,使用產(chǎn)品時(shí)要搖動并加
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