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上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第15年
恒遠(yuǎn)生物|磷酸鹽標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備過(guò)程2024/01/18
磷酸鹽標(biāo)準(zhǔn)溶液是用于化學(xué)分析中的一種常見試劑,常常用于測(cè)定水樣中的磷含量、環(huán)境監(jiān)測(cè)及生物化學(xué)研究等領(lǐng)域。如制作標(biāo)準(zhǔn)工作曲線、驗(yàn)證儀器的準(zhǔn)確度、作為水樣標(biāo)準(zhǔn)的對(duì)比濃度、研究磷酸鹽濃度對(duì)實(shí)驗(yàn)的影響等。一、磷酸鹽標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備方法1.選用高純度的磷酸二氫鉀和氫氧化鈉,以及去離子水。2.在清潔的容器中,稱取適量的磷酸二氫鉀,將其溶于去離子水中,直至完-全溶解。3.將氫氧化鈉溶液緩慢加入到磷酸二氫鉀溶液中,并用磁力攪拌器充分?jǐn)嚢?,直到pH值穩(wěn)定在7.0左右。4.將溶液轉(zhuǎn)移至250毫升容量瓶中,加入足夠的去
恒遠(yuǎn)生物帶大家了解還原酶檢測(cè)需知2024/01/11
能夠還原斐林(H.vonFehling)試劑(本尼迪特試劑)或托倫斯(B.Tollens)試劑的糖稱為還原糖,所有的單糖(除二羥丙酮),不論醛糖、酮糖都是還原糖。大部分雙糖也是還原糖,蔗糖例外。斐林試劑是含Cu2+絡(luò)合物的溶液,被還原后得到磚紅色Cu2O的沉淀。托倫斯試劑被還原后能生成單質(zhì)銀,發(fā)生“銀鏡反應(yīng)”。分子結(jié)構(gòu)中含有還原性基團(tuán)(如游離醛基或游離酮基)的糖,叫還原糖。如葡萄糖。果糖含有游離的酮基,所以果糖也屬于還原糖。一、還原性質(zhì)一般情況下,單糖的還原能力主要來(lái)自它的醛基,如葡萄糖,而多糖
恒遠(yuǎn)生物教大家如何防止細(xì)胞老化2024/01/04
大家在養(yǎng)細(xì)胞的時(shí)候,想必也會(huì)遇到像細(xì)胞狀態(tài)差的這種情況,但是細(xì)胞狀態(tài)差,是由多種原因造成。細(xì)胞狀態(tài)差,常常出現(xiàn)的現(xiàn)象是:細(xì)胞邊緣不清晰、細(xì)胞不飽滿、折光性差、背景比較臟、黑點(diǎn)很多、細(xì)胞碎片多(細(xì)胞凋亡后的細(xì)胞碎片)、單個(gè)細(xì)胞內(nèi)有空泡(凋亡)且空泡比較多;如果細(xì)胞出現(xiàn)老化,也就是細(xì)胞比較扁平、增殖減緩、細(xì)胞核體積增大、細(xì)胞突觸變多,此時(shí)觀察到的細(xì)胞狀態(tài)也是不正常的。所以,除了考慮血清和細(xì)菌污染的問(wèn)題,細(xì)胞老化的問(wèn)題也是不容忽視的!一、什么是細(xì)胞老化?1882年,德國(guó)生物學(xué)家Weismann曾大膽預(yù)
恒遠(yuǎn)生物|細(xì)胞融合的方法與注意事項(xiàng)2023/12/22
一、細(xì)胞融合的方法有三種1.生物方法2.化學(xué)方法3.物理方法。二、細(xì)胞融合也稱細(xì)胞雜交,是指細(xì)胞通過(guò)介導(dǎo)和培養(yǎng),在離體條件下用人工方法將不同種的細(xì)胞通過(guò)無(wú)性方式融合(合并)成一個(gè)核或多核的雜合細(xì)胞的過(guò)程。體細(xì)胞融合后可形成四倍體或多倍體細(xì)胞,由此形成的雜交細(xì)胞,其特性會(huì)有很大的變化。三、化學(xué)誘導(dǎo)融合1.鹽類融合法。此法是應(yīng)用最早的誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的方法,鹽類融合劑對(duì)原生質(zhì)體的破壞小,研究應(yīng)提高其融合率,使其對(duì)液泡化發(fā)達(dá)的原生質(zhì)體能夠誘發(fā)融合。2.高鈣和高pH值融合法。高Ca2+和高pH值可以誘發(fā)
恒遠(yuǎn)生物|標(biāo)準(zhǔn)曲線的正確繪制方法2023/12/15
分析檢測(cè)中繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線目的是可以根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線查出待測(cè)物質(zhì)的含量,所以標(biāo)曲的制定是實(shí)驗(yàn)室工作中必bi不可少的一環(huán)。那么問(wèn)題來(lái)了,做標(biāo)準(zhǔn)曲線真的那么簡(jiǎn)單嗎?您所做的標(biāo)準(zhǔn)曲線真的做好了嗎?導(dǎo)致標(biāo)準(zhǔn)曲線彎曲的原因是什么呢?RSD值、線性相關(guān)系數(shù)和線性方程如何?線性好與不好分別是由于哪些原因造成的?是儀器、標(biāo)液,還是配制的問(wèn)題?接下來(lái)恒遠(yuǎn)生物為您揭曉答案!一、前期測(cè)定時(shí)注意:1.儀器校驗(yàn)好。2.移取液體體積要精確,保證迅速準(zhǔn)確,盡可能用一根移液管;為減小人為所帶來(lái)的誤差,同一種液體需由同一個(gè)人操作;3.保
恒遠(yuǎn)生物|配制培養(yǎng)基的4大原則2023/11/21
一、目的明確培養(yǎng)不同的微生物必須采用不同的培養(yǎng)條件,培養(yǎng)目的不同,原料的選擇和配比不同,例如:枯草芽孢桿菌,一般培養(yǎng),肉湯培養(yǎng)基或LB培養(yǎng)基;自然轉(zhuǎn)化,基礎(chǔ)培養(yǎng)基,觀察芽孢,生孢子培養(yǎng)基,產(chǎn)蛋白酶以玉米粉、黃豆餅粉為主的產(chǎn)酶培養(yǎng)基;根據(jù)不同的工作目的,微生物不同的營(yíng)養(yǎng)需要,運(yùn)用自己豐富的生物化學(xué)和微生物學(xué)知識(shí)來(lái)配制最-佳的培養(yǎng)基。二、營(yíng)養(yǎng)協(xié)調(diào)微生物細(xì)胞組成元素的調(diào)查或分析,是設(shè)計(jì)培養(yǎng)基時(shí)的重要參考依據(jù)。微生物細(xì)胞內(nèi)各種成分間有一較穩(wěn)定的比例。在大多數(shù)化能異養(yǎng)菌的培養(yǎng)基中,各營(yíng)養(yǎng)要素間在量上的比例
恒遠(yuǎn)生物|常用消毒劑的使用指南2023/11/14
一、醇類消毒劑1.有效成分:乙醇含量為70%~80%(v/v),含醇手消毒劑>60%(v/v),復(fù)配產(chǎn)品可依據(jù)產(chǎn)品說(shuō)明書。2.應(yīng)用范圍:主要用于手和皮膚消毒,也可用于較小物體表面的消毒。3.使用方法:①.衛(wèi)生手消毒:均勻噴霧手部或涂擦揉搓手部1~2遍,作用1min。②.外科手消毒:擦拭2遍,作用3min。③.皮膚消毒:涂擦皮膚表面2遍,作用3min。④.較小物體表面消毒:擦拭物體表面2遍,作用3min。4.注意事項(xiàng):①.如單一使用乙醇進(jìn)行手消毒,建議消毒后使用護(hù)手霜。②.外用消毒液,不得口服,置
恒遠(yuǎn)生物|細(xì)胞培養(yǎng)需知2023/11/07
隨著時(shí)代的發(fā)展,現(xiàn)如今的生命科學(xué)事業(yè)也在蓬勃發(fā)展,國(guó)內(nèi)越來(lái)越多的實(shí)驗(yàn)室開始做起了細(xì)胞培養(yǎng)的相關(guān)實(shí)驗(yàn),如果你打算或者是正在做細(xì)胞培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)?zāi)敲匆韵碌膬?nèi)容會(huì)對(duì)你的實(shí)驗(yàn)有所幫助。1、選擇正確的培養(yǎng)基在養(yǎng)細(xì)胞之前,就要了解,你所養(yǎng)細(xì)胞的來(lái)源以及種類和名稱,查閱一定量的文獻(xiàn),確定所需培養(yǎng)液種類以及是否需要添加特殊成分,常用的細(xì)胞培養(yǎng)液有DMEM、RPMI1640、F12等等,一些常見的細(xì)胞基本可以使用這幾種培養(yǎng)基中的一種來(lái)培養(yǎng),有的需要加入一定其他成分,這需要根據(jù)不同的細(xì)胞類型,查ATCC細(xì)胞庫(kù)或者查文獻(xiàn)
恒遠(yuǎn)生物|實(shí)驗(yàn)誤差,控制和消除的方法2023/11/01
一、誤差的來(lái)源一個(gè)客觀存在的具有一定數(shù)值的被測(cè)成分的物理量,稱為真實(shí)值,測(cè)定值與真實(shí)值之差稱為誤差。根據(jù)產(chǎn)生誤差的原因,通常分為系統(tǒng)誤差和偶然誤差兩類。系統(tǒng)誤差:是由固定原因造成的誤差,在測(cè)定的過(guò)程中按一定規(guī)律重復(fù)出現(xiàn),有一定的方同性,即測(cè)定值總是偏高或總是偏低,這種誤差的大小是可測(cè)的,所以又稱“可測(cè)誤差”。它來(lái)源于分析方法誤差、儀器誤差、試劑誤差和主觀誤差,如分析人員掌握操作規(guī)程與操作條件等因素。偶然誤差:是由于一些偶然的外因所引起的誤差,產(chǎn)生的原因往往是不固定的、未知的,且大小不一、或正或負(fù)
恒遠(yuǎn)生物帶大家認(rèn)識(shí)HE染色的基本原理2023/10/24
上海恒遠(yuǎn)生物今天來(lái)給大家介紹一種細(xì)胞實(shí)驗(yàn)常用的染色方法,即蘇木精—伊紅染色法(hematoxylin-eosinstaining),簡(jiǎn)稱HE染色法。一、HE染色基本原理(1)細(xì)胞核染色原理蘇木精為堿性天然染料,可使細(xì)胞核著色。細(xì)胞核內(nèi)染色質(zhì)的成分主要是DNA,在DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)中,兩條核苷酸鏈上的磷酸基向外,使DNA雙螺旋的外側(cè)帶負(fù)電荷,呈酸性,很容易與帶正電荷的蘇木精堿性燃料以離子鍵或氫鍵結(jié)合而被染色。蘇木精在堿性溶液中呈藍(lán)色,所以細(xì)胞核被染成藍(lán)色。(2)細(xì)胞漿染色原理細(xì)胞漿內(nèi)主要成分是蛋白
恒遠(yuǎn)生物|免疫熒光技術(shù)的基本原理2023/10/17
免疫熒光技術(shù)又稱熒光抗體技術(shù),是標(biāo)記免疫技術(shù)中發(fā)展zui早的一種。它是在免疫學(xué)、生物化學(xué)和顯微鏡技術(shù)的基礎(chǔ)上建立起來(lái)的一項(xiàng)技術(shù)。很早以來(lái)就有一些學(xué)者試圖將抗體分子與一些示蹤物質(zhì)結(jié)合,利用抗原抗體反應(yīng)進(jìn)行組織或細(xì)胞內(nèi)抗原物質(zhì)的定位。該技術(shù)的主要特點(diǎn)是:特異性強(qiáng)、敏感性高、速度快。主要缺點(diǎn)是:非特異性染色問(wèn)題尚未完quan解決,結(jié)果判定的客觀性不足,技術(shù)程序也還比較復(fù)雜。一、原理免疫學(xué)的基本反應(yīng)是抗原-抗體反應(yīng)。由于抗原抗體反應(yīng)具有高度的特異性,所以當(dāng)抗原抗體發(fā)生反應(yīng)時(shí),只要知道其中的一個(gè)因素,就可
恒遠(yuǎn)生物帶大家了解免疫熒光技術(shù)的兩種檢測(cè)方法2023/10/09
免疫熒光技術(shù)有兩種檢測(cè)方法:用熒光標(biāo)記抗體示蹤或檢測(cè)相應(yīng)抗原的方法稱熒光抗體法;用已知的熒光標(biāo)記抗原示蹤或檢測(cè)相應(yīng)抗體的方法稱熒光抗原法。(熒光抗體方法較常用)1.在開始實(shí)驗(yàn)研究前,有哪些因素需要考慮?(1)根據(jù)抗原選擇合適的抗體,確認(rèn)抗原可以識(shí)別哪一種異構(gòu)體以及抗原表位的位置。(2)確認(rèn)目的蛋白在該樣本中是否表達(dá)。(3)根據(jù)所要研究的目標(biāo)蛋白來(lái)確定合適的樣本類型(石蠟切片、冰凍切片還是細(xì)胞制備物等)。(4)選擇抗體時(shí)需要考慮該抗體的物種交叉反應(yīng)。(5)關(guān)于蛋白,需要考慮它的組織定位和細(xì)胞定位,
恒遠(yuǎn)生物|原代細(xì)胞培養(yǎng)的應(yīng)用以及注意事項(xiàng)2023/09/26
一、原代細(xì)胞培養(yǎng)的應(yīng)用1.為研究生物體細(xì)胞的生長(zhǎng)、代謝、繁殖提供有力的手段;2.為傳代培養(yǎng)創(chuàng)造條件;3.服務(wù)于臨床實(shí)踐,用于藥物篩選等。二、原代細(xì)胞培養(yǎng)的分離注意事項(xiàng)1、組織塊培養(yǎng)法1)組織塊接種后的前3天,在觀察和移動(dòng)的過(guò)程中,注意不要引起液體的振蕩。要避免經(jīng)常翻動(dòng)和振動(dòng),否則組織塊不易附著于瓶壁上或附著后也會(huì)脫落飄起。2)加入的培養(yǎng)液不宜過(guò)多,避免浸泡的組織塊受輕微的波動(dòng)而脫落下來(lái)。3)當(dāng)細(xì)胞向外遷徙出來(lái)后要注意記錄并去除漂浮的組織塊和殘留的細(xì)胞,它們產(chǎn)生的有毒物質(zhì)會(huì)影響原代細(xì)胞的生長(zhǎng)。4)
恒遠(yuǎn)生物|體外培養(yǎng)的細(xì)胞2023/09/20
體外培養(yǎng)的細(xì)胞,按照生長(zhǎng)方式可分為黏附型細(xì)胞和懸浮型細(xì)胞兩大類。一、黏附型細(xì)胞黏附型細(xì)胞是必須附著在某一固相支持物表面才能生長(zhǎng)的細(xì)胞。由于體內(nèi)、外生長(zhǎng)環(huán)境不同,故細(xì)胞在體內(nèi)、外的黏附方式也存在差異。在體內(nèi),細(xì)胞的黏附是的,細(xì)胞的各個(gè)部分都與周圍環(huán)境相接觸,因而細(xì)胞外形具有復(fù)雜的立體特征。當(dāng)細(xì)胞被轉(zhuǎn)移到體外環(huán)境中之后,能夠提供附著面的只有培養(yǎng)器皿的壁,大多數(shù)情況下,細(xì)胞只有一個(gè)附著平面,因而培養(yǎng)細(xì)胞的外形一般與在體內(nèi)時(shí)明顯不同。按照培養(yǎng)細(xì)胞的主要形態(tài),可將黏附型細(xì)胞分為以下幾大類型:1、成纖維細(xì)胞
恒遠(yuǎn)生物|蛋白的保存條件受哪些因素的影響呢?2023/09/11
生物大分子的貯藏保存可分為干態(tài)和液態(tài)貯藏兩種。所以蛋白保存也有干態(tài)保存和液態(tài)保存兩種。但是蛋白保存條件卻受諸多因素的影響。下面就為大家分析一下影響蛋白保存條件的因素。蛋白質(zhì)失活受多種理化因素的影響,主要有空氣、溫度、水分、光線、酸堿度、樣品狀態(tài)、微生物活動(dòng)、保存時(shí)間和容器等;這些因素可單獨(dú)起作用,但更多情況是協(xié)同作用;以下就對(duì)蛋白保存條件受到的影響進(jìn)行簡(jiǎn)要分析1.空氣空氣的影響主要與潮解、微生物污染及自動(dòng)氧化等有關(guān)??諝庵械奈⑸镂廴究蓪?dǎo)致樣品腐敗變質(zhì),吸濕后的樣品除潮解變性外也會(huì)造成微生物活動(dòng)
恒遠(yuǎn)生物|血清中出現(xiàn)沉淀物的原因及避免方法2023/09/05
血清:指血液凝固后,在血漿中除去纖維蛋白原分離出的淡黃色透明液體或指纖維蛋白原已被除去的血漿。主要作用是提供基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、提供激素和各種生長(zhǎng)因子、提供結(jié)合蛋白、提供促接觸和伸展因子使細(xì)胞貼壁免受機(jī)械損傷、對(duì)培養(yǎng)中的細(xì)胞的起到某些保護(hù)作用。用于細(xì)胞培養(yǎng)的胎牛血清以及其它血清中可能存在的沉淀物有以下三種:1.纖維蛋白:它是經(jīng)常出現(xiàn)的較大的沉淀物,可以達(dá)到1-2mm,肉眼可觀。因?yàn)檠宥际窃诘蜏叵逻M(jìn)行收集和快速處理的,一些纖維蛋白原(可溶性的形成絮狀纖維蛋白的前體)在處理過(guò)程中仍然處于溶解狀態(tài),當(dāng)經(jīng)過(guò)
恒遠(yuǎn)生物|如何鑒定微生物2023/08/30
微生物是對(duì)藥品原料、生產(chǎn)環(huán)境和成品造成污染的重要因素,也是造成生產(chǎn)失敗、成品不合格、對(duì)人類造成危害的重要因素。所以分離得到的污染微生物,進(jìn)行微生物鑒定,是十分必要的,也可為檢驗(yàn)和生產(chǎn)提供有效的依據(jù)。1、形態(tài)學(xué)特征(1)細(xì)胞形態(tài)在顯微鏡下觀察細(xì)胞外形大小、形狀、排列等,細(xì)胞構(gòu)造,革蘭氏染色反應(yīng),能否運(yùn)動(dòng)、鞭毛著生部位和數(shù)目,有無(wú)芽孢和莢膜、芽孢的大小和位置,放線菌和真菌的繁殖器官的形狀、構(gòu)造,孢子的數(shù)目、形狀、大小、顏色和表面特征等。(2)群體形態(tài)通常是指以下情況的特征:1)在一定的固體培養(yǎng)基上生
恒遠(yuǎn)生物帶大家了解一下何為脫落酸2023/08/22
脫落酸是植物五大天然生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑之一,是生物學(xué)中常用作植物組織培養(yǎng)。脫落酸在衰老的葉片組織、成熟的果實(shí)、種子以及莖、根部等許多部位形成。(水分的虧缺可以促進(jìn)脫落酸的形成)脫落酸的作用:1.一直與促進(jìn)生長(zhǎng),外施脫落酸濃度高時(shí)抑制莖、下胚軸、根、胚芽鞘和葉片的生長(zhǎng),濃度低時(shí)促進(jìn)離體黃瓜子葉生根與下胚軸伸長(zhǎng),加速浮萍的繁殖,刺激單性結(jié)實(shí)種子發(fā)育。2.維持芽與種子休眠。(休眠與體內(nèi)赤霉素與脫落酸的平衡有關(guān))3.促進(jìn)果實(shí)與葉的脫落。4.促進(jìn)氣孔關(guān)閉。脫落酸可使氣孔快速關(guān)閉,對(duì)植物又無(wú)du害,是一種很好的抗蒸
? 恒遠(yuǎn)生物|無(wú)血清培養(yǎng)基的好處和壞處都有哪些?2023/08/16
無(wú)血清培養(yǎng)基是在合成培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的,和傳統(tǒng)的培養(yǎng)基不一樣的是,它既能滿足細(xì)胞在體外長(zhǎng)時(shí)間培養(yǎng)的要求,也能避免動(dòng)物血清中所帶來(lái)的不利因素。無(wú)血清培養(yǎng)基的發(fā)展歷程分為無(wú)血清培養(yǎng)基、無(wú)動(dòng)物源培養(yǎng)基、無(wú)蛋白培養(yǎng)基及化學(xué)成分限定培養(yǎng)基四類。在使用無(wú)血清培養(yǎng)基時(shí),有些細(xì)胞需要逐漸適應(yīng),即先將原來(lái)的培養(yǎng)基與無(wú)血清培養(yǎng)基混合培養(yǎng),再轉(zhuǎn)為完整的無(wú)血清培養(yǎng)基培養(yǎng)。有些貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞,復(fù)蘇時(shí)也可用少量的血清先培養(yǎng)(血清可以幫助細(xì)胞貼壁),然后再轉(zhuǎn)為無(wú)血清培養(yǎng)基。無(wú)血清培養(yǎng)基由營(yíng)養(yǎng)較wan全的基礎(chǔ)培養(yǎng)基和補(bǔ)充
恒遠(yuǎn)生物|ELISA試劑盒變質(zhì)的原因是什么呢?2023/08/07
在ELISA實(shí)驗(yàn)中我們經(jīng)常會(huì)碰到試劑盒變質(zhì)的問(wèn)題,是什么原因?qū)е铝薊LISA試劑盒的變質(zhì)呢?接下來(lái)我就和大家說(shuō)一說(shuō)導(dǎo)致ELISA試劑盒變質(zhì)的原因有哪些。導(dǎo)致ELISA試劑盒變質(zhì)的原因主要分為七種:1、方法學(xué)的影響ELISA測(cè)定模式包括以下幾種:雙抗體夾心法、間接法、雙抗原夾心法、IgM抗體捕捉法、競(jìng)爭(zhēng)抑制法,其中競(jìng)爭(zhēng)抑制法(HBeAb,HBcAb等采用)因受操作時(shí)差所引起的bu公平競(jìng)爭(zhēng)等因素的影響,結(jié)果重復(fù)性較差,質(zhì)量較難控制。2、試劑因素不同批次的ELISA試劑在制作過(guò)程中很難保證質(zhì)量一致,即
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